牛蒡叶中绿原酸的提取纯化工艺研究

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牛蒡(Arctium lappa L.)是菊科二年生大型草本植物,目前在我国已实现大面积的人工栽培。牛蒡自身含有多种次生代谢物质,病虫害很少侵染,是较好的药食同源植物。绿原酸是牛蒡叶中含量较高的有效成份之一,具有抗菌、抗病毒、解热、升高白细胞、保肝利胆、免疫调节、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基等作用。因此,从丰富的牛蒡叶资源中提取分离出较高含量的绿原酸提取物,具有重要的意义。本文在详细总结了目前绿原酸提取与分离方法的基础上,对用乙醇溶液提取和大孔吸附树脂分离法进行了深入研究。通过正交实验和单因素实验对提取溶剂、提取时间、料液比、提取温度和提取液pH进行考察,确定了最佳提取工艺。在对绿原酸的分离富集时,采用了对环境和人体无毒害作用的树脂吸附工艺,通过对五种不同大孔吸附树脂对绿原酸的吸附分离性能的研究,筛选出NKA-9型树脂用于牛蒡叶提取液中绿原酸的分离富集,进一步考察了该树脂的动态吸附性能,进样液pH、进样液流速对树脂吸附性能的影响,以及洗脱剂的选择,得出最佳分离条件。结果如下:1.提取工艺:采用乙醇回流法研究了牛蒡叶中绿原酸的提取工艺。并采用紫外可见分光光度法确定了绿原酸的最大吸收波长为328nm。结果表明:用紫外可见分光光度法测定牛蒡叶中的绿原酸含量,相对标准偏差较小,说明测定结果重现性好,精密度较高,所得数据精确。采用单因素和正交试验的方法,通过多重比较等统计手段,对影响绿原酸提取率的主要因素进行了分析,得到了从牛蒡叶中提取绿原酸的最佳工艺条件:用60%乙醇,1: 14的料液比在70℃提取3h,绿原酸的得率约为1.82%。2.纯化工艺:研究大孔树脂吸附纯化绿原酸的最佳工艺条件和参数。通过比较五种大孔树脂对绿原酸的吸附和解吸附性能,得NKA-9树脂吸附和解吸附性能较好。吸附参数如下:吸附液绿原酸的浓度为0.259 mg·mL-1、吸附液pH值为4、流速为4BV/h;解吸参数如下:解吸剂为50%乙醇、解吸剂流速为4BV/h、解吸液pH值为4,在此条件下,得到含绿原酸26.3%的粗产品,收率为72.5%。3.建立了一条分离提取绿原酸的工艺路线,产品安全性高,且纯度较高,成本低,适用于生产工艺路线。
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