基于PI3K/AKT信号通路探究薯蓣丸联合环磷酰胺调节乳腺癌上皮细胞—间充质转换(EMT)的作用机制

来源 :贵州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chrron
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目的:探究薯蓣丸联合环磷酰胺对抑制肿瘤生长及4T1乳腺癌小鼠体内上皮细胞间-充质转换(EMT)的影响和作用机制。方法:将24只6周龄BALB/c小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组和薯蓣丸联合环磷酰胺组,每组8只,于小鼠右侧下腹部乳房垫注射4T1细胞悬液复制荷瘤模型。成瘤后,环磷酰胺组予以腹腔注射环磷酰胺(100mg/kg),每7天1次,共3次,治疗21天;薯蓣丸联合环磷酰胺组在腹腔注射环磷酰胺(100mg/kg)当日起每日予以薯蓣丸(15ml/kg)灌胃处理;模型予以等量PBS腹腔注射每7天1次,共3次,当日起每日予以等量蒸馏水灌胃处理,治疗21天。期间每3天测量小鼠肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线。治疗结束后处死小鼠,取出皮下成瘤组织。应用免疫印迹实验(Western blot)检测小鼠肿瘤组织中E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Akt和磷酸化Akt(p-Akt)的蛋白表达水平;应用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测E-Cadherin和Vimentin的mRNA表达水平。结果:1、治疗后第6天:与模型组相比,环磷酰胺组、薯蓣丸联合环磷酰胺组肿瘤体积较小,生长速率减缓(P<0.05)。从治疗治疗后第9天起,第12天、15天、18天和第21天:与模型组相比,环磷酰胺组、薯蓣丸联合环磷酰胺组肿瘤体积较小,生长速率减缓(P<0.05);与环磷酰胺组相比,薯蓣丸联合环磷酰胺组肿瘤体积均较小,生长速率均减缓(P<0.05)。2、Western blot结果显示,与模型组相比,环磷酰胺组和薯蓣丸联合环磷酰胺组小鼠肿瘤中的Vimentin、p-Akt/Akt的蛋白水平明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白的表达水平明显增加(P<0.05),薯蓣丸联合环磷酰胺组较环磷酰胺组变化更为显著(P<0.05);3、RT-q PCR结果显示,环磷酰胺组和薯蓣丸联合环磷酰胺组小鼠肿瘤中的Vimentin的mRNA表达水平降低(P<0.05),E-cadherin的mRNA表达水平升(P<0.05),薯蓣丸联合环磷酰胺组较环磷酰胺组变化更为显著(P<0.05)。结论:1、薯蓣丸联合环磷酰胺对肿瘤生长的抑制作用优于环磷酰胺组,说明薯蓣丸在乳腺癌化疗期间具有一定增效作用。2、薯蓣丸联合环磷酰胺可通过PI3K/AKT信号通路下调乳腺癌肿瘤中的p-Akt/Akt和Vimentin蛋白表达和mRNA表达,上调E-cadherin蛋白和mRNA表达,减少EMT发生,从而对肿瘤的转移有一定的抑制作用。
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