TBC1D3转基因食蟹猴的构建及初步分析

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大量的大脑皮层沟回是人类大脑的典型特征,这一结构的存在极大地扩展了大脑皮层的面积,增加了皮层神经元的数量,为智能的产生创造了重要条件。目前,大脑皮层沟回产生的具体机制尚不清楚。我们研究组之前的研究证明人和黑猩猩特有的蛋白质TBC1D3对皮层发育有重要影响。通过胚胎电转及转基因技术在小鼠脑中大量表达TBC1D3蛋白,小鼠的大脑表面出现了大量沟回状结构。食蟹猴是一种常用的非人灵长类动物模型,相较与小鼠其生理指标更接近人类。以食蟹猴为模型可以更进一步地探究TBC1D3在皮层沟回形成过程中的作用。我们和本所苏州非人灵长类动物平台合作,通过卵母细胞慢病毒注射的方法,将人类TBC1D3基因转入食蟹猴体内。经PCR及全基因测序鉴定确认,我们成功得到了一只带有人类TBC1D3基因的转基因食蟹猴。经过蛋白免疫印迹法检测,TBC1D3蛋白确已在食蟹猴体内成功表达。另外,我们对流产猴子进行了切片观察,发现转基因猴脑部存在大量积水,且其大脑皮层结构有一定程度的改变。行为实验发现转基因猴的自发运动行为正常,而社交行为存在明显异常。通过对转基因猴及对照组的长期观察,发现其体温体重等主要生理指标都与正常猴子无明显差异。核磁共振数据表明转基因猴的沟回指数与正常猴子无明显差异。这些结果表明TBC1D3蛋白的表达对食蟹猴自发运动没有影响,蛋白未能对初级运动皮层的功能产生明显影响,对社交等高级脑功能可能存在一定影响。本工作中建立的转基因食蟹猴为研究TBC1D3基因对皮层发育的影响,乃至皮层沟回结构对智力发展的影响等重要课题提供了较好的动物模型。
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