巴州牦牛三个试验点蜱传牛环形泰勒虫病的流行病学调查

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牛环形泰勒虫病是一类血液原虫引起的蜱传性疾病,该虫体为泰勒科(Theileriidae)泰勒属(Theileria),以侵袭牛类动物的红细胞、淋巴细胞和巨噬细胞为特点。该疫病患病率在某些牦牛场达35~60%,病死率达46.4%,严重制约着地方经济发展。本文在牦牛主产区巴州三个试验点(和静县乌拉斯台村牦牛牧场、巴音布鲁克村牦牛场及和硕县牦牛场)采集硬蜱(N=1782)和疑似发病牦牛血样(抗凝血样品N=304,血清样品N=304),借助体视显微镜,经形态学特点进行媒介蜱种属鉴定及对其DNA进行基因测序进行分子生物学分类,对媒介蜱的优势度、染蜱率等进行统计分析;通过PCR和ELISA方法对采集到的血样进行检测分析该病在当地的流行情况。为牦牛主产区域不断提高对牛环形泰勒虫病的综合防控意识提供了数据依据。(I)本试验在上述三个试验点共采集1782枚硬蜱,通过体视显微镜观察、进行了形态学鉴定;并通过对蜱类COI基因设计合成了特异性引物通过PCR扩增与测序,对其进行分子生物学鉴定。结果显示,所采集的1782枚硬蜱,鉴定出两属5种蜱,即:革蜱属的草原革蜱424枚,银盾革蜱499枚,森林革蜱324枚;璃眼蜱属的残缘璃眼蜱209枚,小亚璃眼蜱326枚;基于COI基因经PCR扩增出约700 bp的目的条带,与Gen Bank中已登录的草原革蜱、银盾革蜱、森林革蜱、残缘璃眼蜱、小亚璃眼蜱(Sequence ID:KU594271.1、JQ737080.1、JQ737078.1、EU827695.1、KM235701.1)COI基因序列的同源性分别为99.00%、99.00%、99.00%、99.00%、99.00%;银盾革蜱的相对优势度为28.00%;草原革蜱,银盾革蜱,森林革蜱,残缘璃眼蜱及小亚璃眼蜱的蜱指数分别为35.33、41.58、27.00、17.42及27.17。牦牛感染草原革蜱,银盾革蜱,森林革蜱,残缘璃眼蜱及小亚璃眼蜱的染蜱率分别为92.00%、92.00%、83.00%、50.00%及75.00%。调查中发现试验点牦牛牧场为草原放牧型,与其它各种家畜(羊、牛、马)交错放牧,接触频繁,为当地牦牛体表寄生虫—媒介蜱群落的物种丰富度、多样性提供了有利条件。(II)本试验,对所采集到的304头份血样(抗凝血、血清各304份),根据牛环形泰勒虫的Tams1基因合成特异性引物进行PCR检测抗凝血,通过Bovine T.annulata ELISA KIT进行检测血清,筛选阳性血样,并进行分析。结果显示,PCR检测总阳性率为25.00%(76/304);ELISA阳性率为25.66%(78/304);这两种方式阳性结果符合率为97.43%,表明这两种检测方式都适用于牦牛环形泰勒虫病的检测;和静县乌拉斯台村牦牛牧场、巴音布鲁克村牦牛牧场及和硕县牦牛牧场三个试验点ELISA检测出阳性率分别为:26.85%、27.00%、22.92%。当地的灌木丛区植被适合蜱类孳生、交错放牧等,便于传播环形泰勒虫,乌拉斯台村牦牛牧场、巴音布鲁克村牦牛牧场两个试验点偏高。
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