A23187诱导蓝狐精子顶体反应的研究

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精子顶体反应(acrosome reaction,AR)是动物受精的前提,精子顶体反应的研究对动物繁殖的理论与实践都具有重要意义。本研究以蓝狐(Alopex lagopus)为实验动物,对钙离子载体A23187(calcium ionophore A23187,IA)诱导蓝狐精子顶体反应作用效果进行研究;通过实验筛选A23187诱导蓝狐精子顶体反应的适宜浓度和最佳作用时间。讨论A23187溶剂——二甲基亚砜(DMSO)对未获能精子和获能精子的顶体反应率和活率的影响。根据报道和预实验结果,本研究设计了9个A23187作用浓度和6个DMSO作用浓度。同时讨论了牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的存在对A23187诱导蓝狐精子顶体反应作用效果的影响。本研究利用考马斯亮蓝染色法检测精子顶体状态并考察顶体反应率,伊红-苯胺黑染色检测死活精子比率,通过以上两种指标对实验结果进行评价。实验结果表明:1、0.1%,0.2%,0.5%浓度的DMSO对未获能蓝狐精子顶体反应率及活率在2小时内无显著影响。随着DMSO浓度的上升蓝狐精子的活率显著下降(P<0.05)。2、0.1%,0.2%,0.5%浓度的DMSO对已进行获能处理的蓝狐精子顶体反应有促进作用。高浓度DMSO使获能蓝狐精子活率明显降低(P<0.05)。3、蓝狐精子体外获能及顶体反应实验中,DMSO的浓度应控制在0.5%以下。4、A23187可提高获能蓝狐精子的顶体反应率,A23187对于蓝狐精子最适宜的作用浓度为5μmol/L;处理时间以7分钟为宜。5、A23187对未获能蓝狐精子顶体反应诱导作用不明显(P>0.05)。6、BSA的存在,对A23187诱导蓝狐精子顶体反应效果影响不显著(P>0.05)。
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