论文部分内容阅读
背景:外泌体(exosomes)是一类直径在30-120nm之间、密度在1.13-1.19g/m L的脂质双分子层的小囊泡,它们可被受体细胞吸收。Exosomes可由多种细胞分泌,如红细胞、血小板、树突状细胞、肥大细胞、上皮细胞、肿瘤细胞等。近年来,大量证据表明exosomes能以多种机制参与疾病发生发展的全过程,从而在细胞调控、细胞增殖、细胞分化等多种生物学进程中发挥重要的作用。最初认为exosomes是包裹细胞内“废弃”物质的“垃圾袋”,没有生物学功能,然而最近骨髓间充质干细胞来源(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的exosomes被证实可作为多种药物的载体,在肿瘤治疗中发挥着关键的作用。然而经mi R-150*修饰的BMSCs-exosomes能否对胶质瘤细胞系发挥抑癌作用,尚不清楚。目的:研究mi R-150*修饰对骨髓间充质干细胞来源的exosomes(BMSCs-exosomes)对胶质瘤细胞的影响。方法:通过实时定量逆转录聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测mi R-150*在胶质母细胞瘤组织与正常组织间的表达量差异。培养骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs),分别转染mi R-150*模拟物和阴性对照序列,上调BMSCs中mi R-150*表达水平,提取BMSCs培养基中的exosome。通过Western blotting验证exosomal的表面标记蛋白CD63和flotillin-1,在透射电镜下观察exosome的形态。通过CCK-8和细胞周期实验验证mi R-150*修饰BMSCs来源的exosome对胶质瘤细胞的影响。结果:mi R-150*在胶质母细胞瘤组织中表达明显低于正常脑组织,转染mi R-150*模拟物能明显提高BMSCs来源的exosome中mi R-150*的表达。mi R-150*修饰BMSCs 来源的exosome能有效抑制胶质瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡。结论:mi R-150*在胶质母细胞瘤组织中低表达,mi R-150*修饰BMSCs来源的exosome对胶质瘤细胞有抗增殖,促凋亡的作用。因此exosome可作为核酸类药物的一种有效的基因治疗载体。