BDNF对鼠视网膜Muller细胞谷氨酸转运体GLAST的调控

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目的:研究脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对鼠视网膜M(u)ller细胞L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体(GLAST)的调控作用。 方法:(1)采用组织块培养方法培养出生后3-7天的小鼠视网膜M(u)ller细胞。(2)实验分组:①BDNF干预组:将不同浓度BDNF(50ng/ml,75 ng/ml,100 ng/ml,125 ng/ml及150 ng/ml)分别加入鼠视网膜M(u)ller细胞中培养24小时;②对照组:M(u)ller细胞中不加BDNF。(3)采用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析M(u)ller细胞谷氨酸转运体GLASTmRNA表达的差异。(4)采用免疫细胞化学染色方法检测M(u)ller细胞GLAST蛋白质表达的差异。 结果:(1)不同浓度的BDNF均能上调谷氨酸转运体GLASTmRNA的表达,并且随着BDNF浓度的增大,GLASTmRNA表达量增大,当BDNF浓度为100 ng/ml时进入平台期,GLASTmRNA表达量(灰度值:1.96±0.13)最大。(2)免疫细胞化学显示GLAST蛋白定位于视网膜M(u)ller细胞胞浆和胞膜中。当BDNF浓度为100ng/ml时,干预组M(u)ller细胞内GLAST蛋白的表达量最大,差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论:BDNF可上调GLASTmRNA和GLAST蛋白质的表达,对视网膜M(u)ller细胞谷氨酸转运体GLAST具有正调控作用。
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