弱碱性抑癌液调控癌细胞生长及消亡的作用研究

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第一部分弱碱性抑癌液的设计目的:尽管目前的癌症疗法在不断的进步,但是癌症患者经过治疗后经常引起发转移,对于癌症迫切需要开发新的合理的疗法。这里我们设计了弱碱性抑癌液。方法:以KCl和NaHCO3为原料,探索mk/mNa以不同比例混合,用蒸馏水配制成500mL溶液,然后pH计测量pH值。结果:当mk/mNa等于6时,即用KCl为24g,NaHCO3为4g,用蒸馏水配制成500mL溶液,此时溶液的pH值刚好接近7.45。结论:WACIL按mk/mNa=6,以NaHCO3、KCl分别为4g和24g,用蒸馏水定容至500mL,充分溶解后过滤而成。第二部分弱碱性抑癌液调控癌细胞生长、转移及消亡的体外实验研究目的:测试WACIL是否调控癌细胞的生长转移及消亡,然后试图找到可能的调控机制。方法:在体外,我们检测WACIL对三种细胞株包括子宫颈鳞癌细胞SiHa、非小细胞肺鳞癌细胞H1299以及人乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长增殖,细胞周期,细胞凋亡,侵袭转移的影响。结果:WACIL明显抑制三种细胞系的生长增殖,G2/M期细胞增多,出现G2/M期阻滞,阻止细胞周期的进程。细胞形态呈圆状,细胞核浓缩,caspase-3活性检测增加,线粒体的膜电位降低,细胞凋亡;活细胞数目减少,细胞膜破裂,发生消亡现象,癌细胞迁移明显减少(P﹤0.001)。对目标基因的分析,SCCA1、cyclinB1、MMP-2以及MMP-9的mRNA表达水平下调,Caspase-3的mRNA表达水平上调;SCCA1、cyclinB1和MMP-2蛋白表达下调,Caspase-3蛋白表达上调。结论:弱碱性抑癌液调控癌细胞的生长和转移,介导癌细胞消亡。更重要的是,本研究系统分析弱碱性抑癌液与癌的pH微环境之间的相互作用机制,可以发现改变癌细胞所处的微环境的重要性。第三部分弱碱性抑癌液对移植瘤生长和转移的影响的体内实验研究目的:为了在体内研究弱碱性抑癌液对癌细胞生长转移的影响,并挖掘潜在的治疗意义。方法:建立MDA-MB-231细胞植入4周龄的BALB/C裸鼠颈背皮下的模型,观察弱碱性抑癌液对裸鼠皮下肿瘤生长转移的影响。结果:体内动物实验发现处理组的肿瘤生长较对照组明显缓慢;肺组织HE染色未见明显癌细胞转移,而对照组可见癌细胞转移;WACIL还可能有消退肿瘤血管增生的作用。结论:在体内弱碱性抑癌液可以控制肿瘤的生长,并抑制癌细胞的转移,对肿瘤的防治有潜在意义。
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