慢性乙型肝炎患者性激素受体及TRECs与肝组织病理的相关性研究

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目的研究年龄、雌激素受体a及雄激素受体与慢性乙型肝炎患者肝组织病理学分级、病理分期的相关性,并通过测定外周血单个核细胞内T细胞受体重排删除环含量,分析随年龄变化的胸腺功能对慢性乙型肝炎患者发病与进展可能产生的影响。方法参照2010年中华医学会肝病学分会、中华医学会感染病学分会制订的《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》中诊断标准,按照住院时间选取经过肝穿刺活检的慢性乙型肝炎患者123例,其中男性83例,女性40例,年龄在12-74岁之间。肝穿刺活检前后1周内,清晨空腹采静脉血5ml, Ficoll密度梯度离心方法分离PBMC,300μl RNA later将PBMC重悬后-80℃冰箱冻存;采用荧光定量RT-PCR方法测定PBMC内雌激素受体a(ERa)mRNA,雄激素受体(AR)mRNA; PBMC中T细胞受体重排删除环(TREC)采用荧光定量PCR方法测定;1秒钟经皮肝穿刺法取肝组织,光学显微镜下观察确定肝组织病理学分级和分期;采用免疫组织化学方法测定肝组织内ERα、AR。结果实验一1.慢性乙型肝炎患者肝组织内ERa的表达在不同性别、病理分期之间不存在差异,不同病理分级ERa阳性表达存在显著性差异,P=0.008;2.外周血单个核细胞内ERa mRNA在不同性别之间不存在差异,且与慢性乙型肝炎患者病理学分期不存在相关性,但是与肝组织病理分级呈显著负相关,rs=-0.213,P=0.018:3.外周血单个核细胞内AR mRNA在不同性别慢性乙型肝炎患者差异无统计学意义,AR mRNA与年龄呈显著负相关,r=-0.317,且在不同病理分级、分期之间存在显著性差异,P分别为0.004、0.005;4.年龄与慢性乙型肝炎患者肝组织病理学分期存在正相关,rs=0.263。实验二1.慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞内TREC含量在不同病理学分级、分期之间差异无统计学意义;2.慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞内TREC含量与年龄呈显著负相关,随着年龄的增长TREC逐渐降低,rs=-0.298;3.慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞内TREC表现出性别差异,P=0.049;女性患者TREC含量高于男性。结论1.外周血单个核细胞ARmRNA与慢性乙型肝炎的疾病进展有关,对肝组织病理学分级和分期有一定预测作用,为肝组织炎症程度及纤维化程度的无创评估提供了新依据;ERα对慢性乙型肝炎患者肝组织炎症程度有一定影响;2.外周血单个核细胞内TREC含量与慢性乙型肝炎患者年龄和性别有关;男女胸腺输出功能的不同可能是导致慢性乙型肝炎患者发病率出现性别差异的一个原因。
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