人牙周膜成纤维细胞体外三维立体培养的初步研究

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[目的]对人牙周膜成纤维细胞进行体外藻酸盐支架三维立体培养,并用碱性成纤维细胞生长因子及脂多糖进行干预观察细胞的增殖情况,为进一步了解诱导牙周组织修复的机制提供科学的依据。[方法]组织块培养法获取人牙周膜成纤维细胞,按1:2或1:3的比例进行传代,取4—7代的细胞进行实验。将第4代的细胞进行藻酸盐三维支架培养,比较细胞在二维及三维空间下的增殖情况。在藻酸盐支架三维细胞培养第9天时,分别以1ng/ml、10ng/ml、500ng/ml、1000ng/ml浓度组碱性成纤维细胞生长因子,作用于三维生长状态下的人牙周膜成纤维细胞,用MTT法测定OD值,观察碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜成纤维细胞的增殖的影响,并对实验数据进行统计学分析。在细胞培养第7天时,分别以10 ng/ml、100 ng/ml、500 ng/ml、1000ng/ml浓度组脂多糖,作用于三维生长状态下的人牙周膜成纤维细胞,用MTT法观察脂多糖对人牙周膜成纤维细胞的增殖的影响,并对实验数据进行统计学分析。[结果]在本实验条件下第4代细胞在三维培养下与二维培养下比较细胞增殖情况未见明显差异。与对照组比较,1ng/ml、10ng/ml、500ng/ml、1000ng/ml浓度的碱性成纤维细胞生长因子作用于三维培养状态下的人牙周膜成纤维细胞,在10ng/ml浓度时(P<0.05)促增殖作用最明显。与对照组比较,10ng/ml、100 ng/ml、500 ng/ml、1000ng/ml浓度的脂多糖作用于三维培养状态下的人牙周膜成纤维细胞,在100ng/ml浓度时(P<0.05)抑制作用最明显。[结论]在本实验条件下,在三维二维空间培养中的HPDLFs增殖未见明显差异。10ng/ml浓度的碱性成纤维细胞生长因子能促进HPDLFs的增殖,100ng/ml浓度的脂多糖能抑制HPDLFs的增殖。
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