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水稻是我国最重要的粮食作物之一,但其生产常受到病毒病的影响,迄今为止,已有10多种水稻病毒病在我国发生的报道。水稻条纹病毒(RSV)、水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)、南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)是近年来在江浙一带流行最为严重的3种水稻病毒。病原的检测和诊断一直是作物病害准确预测、预报与高效防控的基础。这3种水稻病毒病害的有效防控同样也离不开准确、快速的检测技术。为此,本研究以这3种病毒为研究对象建立、发展了间接ELISA、多重RT-PCR、RT-LAMP等检测方法。首先以本实验室之前制备的RBSDV特异性抗体为基础,利用P8抗体建立了RBSDV和SRBSDV的间接ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay)法,实验结果表明:当P8抗体稀释3000倍、抗原抗体反应时间为2h、显色时间为40min时,ELISA法检测结果最佳。利用上述条件对本实验室在浙江省内2010年-2011年期间所采集的白背飞虱样品进行检测,结果表明,在检测来自14个不同地区样品中,浦江县白背飞虱带毒率高达14.6%,为全省最高。接着我们针对RSV、RBSDV和SRBSDV基因组上的保守序列设计了3对特异性引物,发展了同步检测这3种水稻病毒的多重RT-PCR技术。梯度PCR实验表明这3对引物的最佳退火温度为63℃,特异性和灵敏度分析显示该方法是一种简单、快速、准确、灵敏的同步检测这3种重要水稻病毒的方法。将该方法应用于单头飞虱以及田间植物样品的检测。结果显示,在越南、上海、广东、海南、湖南、湖北、浙江等地均存在SRBSDV侵染,山东省21个县市和浙江临安等地的玉米粗缩病的病原均为RBSDV,浙江省水稻和飞虱样品中,均检测到了RSV、RBSDV和SRBSDV,表明浙江水稻病毒病原呈多样性,并存在复合侵染的情况。反转录环介导等温扩增(Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification, RT-LAMP)技术是一种新的核酸扩增技术。本研究还针对RBSDV和SRBSDV基因组片断S10各设计了4条特异性引物建立了RT-LAMP检测方法,实验结果显示该技术可用于特异而灵敏地区分这2种病毒,可有效用于单头飞虱和病株样品的检测。此外,我们以血清学和RT-PCR检测方法为基础分析了灰飞虱和白背飞虱室内传播RSV、RBSDV和SRBSDV的特性。