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丝胶有优良的抗氧化性和生物相容性,在组织工程和生物医学等领域有潜在应用前景,但丝胶膜材料的机械性能较差,不同程度上限制了其在包括生物医学等领域中的应用。为了改善再生丝胶蛋白材料的力学性能与功能性,本课题进行了基于漆酶/2,2,6,6-四甲氧基哌啶-1-氧化物(TEMPO)法的丝胶酶促改性研究,通过催化丝胶蛋白自交联及接枝RGD肽,制备改性丝胶膜材料。本文考察了漆酶和TEMPO体系对丝胶蛋白的催化氧化和酶促交联效果。借助于醛基含量分析、羧基和游离氨基定量测定及荧光光谱法,对酶促丝胶蛋白的催化氧化机制进行了探究;通过凝胶电泳、体积排阻色谱(SEC)和膜材料机械性能测试,分析了漆酶和TEMPO体系处理后催化丝胶蛋白的交联效果;借助于ATR-FTIR、TG和ABTS法,考察了交联后丝胶膜材料的二级结构、热稳定性和抗氧化性的变化,还考察了材料的生物相容性;以漆酶和TEMPO催化氧化丝胶膜接枝RGD肽,测定RGD肽在丝胶上的接枝效果,并对照NIH/3T3细胞在丝胶膜材料上的增殖和粘附效果,评价接枝RGD肽对丝胶膜生物活性的影响。研究结果表明,漆酶和TEMPO能催化丝胶蛋白中的丝氨酸和酪氨酸残基,促进丝胶分子间交联,酶促反应后丝胶分子量增大,丝氨酸和酪氨酸残基数减少,体系游离氨基含量下降。在50℃、pH 5条件下,以0.4 U/mL漆酶和1.28 mM TEMPO处理1%(w/v)丝胶蛋白24 h后,制得风干膜材料机械性能明显改善,且膜材料的热稳定性略有增加,二级结构变化微小,材料没有毒性。在上述研究的基础上,通过漆酶和TEMPO体系催化丝胶接枝RGD肽,结果表明接枝改性后的丝胶膜对NIH/3T3细胞的增殖和粘附效果较好,表明基于漆酶和TEMPO体系催化丝胶接枝RGD肽,能显著提升丝胶的生物相容性。