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目的:(1)探讨活性氧(ROS)对精子活力、精子细胞死亡率、核DNA完整及顶体反应的影响;(2)探讨环磷酸鸟苷(cGMP)对ROS诱导的氧化应激对精子损伤的改善作用及其作用机理。方法:经Percoll梯度离心法制作精子悬液,应用计算机辅助分析系统(CASA)进行精子活力分析;应用伊红-Y染色法观察ROS对精子死亡率的影响;应用流式细胞仪(FACS)及ROS敏感的新型荧光探针H2DCF-DA检测精子细胞内活性氧的产生情况;应用RT-PCR检测精子细胞内抗氧化物酶的表达;应用AOT测定精子DNA的完整性;应用FITC-PSA荧光染色法检测精子顶体反应。结果:(1)100μM cGMP增加了精子的前向运动力;(2)200μM SNP对精子的前向运动力无影响,但与LY83583同时孵育精子时,可显著地降低精子的前向运动力;(3)过氧化氢酶(CAT)和cGMP可显著的逆转SNP和LY83583对精子前向性运动的抑制作用;(4)SNP和LY83583同时处理的精子死亡率明显上升,而且可生成大量的活性氧(ROS);(5) cGMP可以显著地诱导CAT和锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)的表达,抑制了活性氧对精子细胞产生的氧化应激损伤;(6)精子的前向运动力随H202浓度的增加呈下降趋势,cGMP可以改善H202对精子前向运动力的抑制作用;(7)H202组DFI明显高于对照组,H2O2+cGMP组、H2O2+CAT组DFI均明显低于H202组,cGMP和CAT可以显著逆转H202对DNA完整性的损伤;(8)cGMP组顶体反应率明显高于对照组、H202组;H202组、SNP组的AR%均高于对照组。结论:(1)低浓度的NO、H2O2可以增加精子活力,高浓度时显著降低精子活力。(2)cGMP在保护精子免受氧化胁迫损伤中可能发挥着重要作用,能够降低ROS的产生、细胞死亡率和DNA完整性。(3)cGMP对抗氧化物酶的诱导表达可能参与了精子的氧化还原反应的调控。(4)cGMP可以促进精子顶体反应的发生。(5)cGMP对体外精子具有独特的生理作用,尤其对于ART的精子制备过程。