研究背景及意义：肝细胞肝癌是第五大恶性肿瘤，也是第三大引起肿瘤相关性死亡的恶性肿瘤。肝细胞肝癌的发病率有着明显的性别、地域差异，在我国是最常见的消化道肿瘤之一，我国的肝癌患者约占全球一半以上，已成为威胁我国人民生命健康的重要凶手。作为肝癌中最常见的一种病理类型，肝细胞性肝癌的发生机制比较复杂，是一个多因素、多途径和长期作用的结果。WNT信号通路是众多肝癌发生发展过程研究中一个重要的方向，因为它在肿瘤的发生、生长、分化、迁移及凋亡中发挥了重要的作用，其中最经典的要数Wnt∕beta-catenin通路。DKK（Dickkopf）蛋白家族是一组分泌性糖蛋白，主要包括DKK-1,2,3,4四个成员。作为Wnt通路中的一种重要拮抗因子，DKK蛋白能够调控Wnt信号通路的异常表达或激活，从而在肝癌的发生发展中发挥作用。我们在研究中发现Dickkopf(DKK)4蛋白可能在正常肝脏组织及癌旁组织中高表达，而在肝癌组织中低表达，这提示DKK4的表达变化或许是肝细胞肝癌发生发展的重要分子机制之一。因此，通过研究DKK4在肝细胞肝癌中的表达及其临床病理特征和预后的关系有助于我们进一步明确其发病机制，考察是否可以将其作为一种原发性肝癌的临床标志，并结合AFP提高肝癌的诊断率以及预后的判断。　　目的：研究Dickkopf(DKK)4在肝细胞肝癌组织中mRNA和蛋白水平的表达情况，以及DKK4与β—catenin在蛋白水平表达关系，探讨DKK4蛋白表达与患者临床病理特征及预后生存的关系，为进一步分子机制研究奠定基础，同时为将来提高患者早期肝癌和复发转移诊断率开辟一个新的途径。　　方法：45例新鲜肝癌组织及其癌旁组织标本、10例正常肝脏组织标本均取自上海交通大学医学院附属仁济医院肝脏外科，采用Real time qPCR（探针法）检测DKK4在上述组织中 mRNA水平表达情况；应用免疫组织化学方法（Immunohistochemistry，SP法）在上述组织中分别检测DKK4和β-catenin蛋白表达情况，同时对组织芯片中224例肝癌患者DKK4蛋白水平表达情况进行了检测，以探讨其与肝癌患者临床病理特征间的关系，并通过相应临床随访分析DKK4蛋白表达情况与患者预后有无关系。　　结果：Real time qPCR（探针法）结果显示DKK4在肝癌组织中mRNA水平表达低于相应的癌旁组织（P＜0.05）；这与性别、年龄、肿瘤大小、AFP、包膜完整与否、分化程度、血管侵润与否等无明显相关性（P＞0.05），这一结果可能与样本量较少有关。DKK4蛋白在肝癌组织表达也低于相应的癌旁组织（P＜0.05），而其正常肝脏组织中的表达高于其余两者（P＜0.05），这与mRNA水平表达一致；β-catenin蛋白在肝癌组织中阳性表达率为56.8％，癌旁组织中为31.8%，在肝癌组织中表达高于对应的癌旁组织（p＜0.05），β-catenin蛋白与DKK4蛋白表达密切相关，呈负相关，r=﹣0.4，p=0.006。DKK4蛋白在肿瘤直径≤5cm、有包膜的肝癌组织中的表达高于肿瘤直径＞5cm（P=0.037）、无完整包膜（P=0.025）的肝癌组织，DKK4蛋白表达与性别、年龄、是否合并肝硬化、肿瘤数目、肿瘤分化程度，血管侵润与否、TNM分级、AFP水平等无明显相关性（P＞0.05）。DKK4高表达组与低表达组术后总生存时间的比较显示：DKK4高表达组的累积术后总生存时间大于DKK4低表达组（P=0.03），中位生存时间分别为51月和39月，DKK4蛋白高表达肝癌患者预后生存时间长于低表达者(P＜0.05），差异有统计学意义。　　结论：DKK4mRNA和蛋白水平上肝细胞肝癌组织中低表达，而在癌旁组织及正常肝脏组织中高表达；β-catenin蛋白在肝癌组织中高表达，并且与DKK4蛋白表达密切相关，呈负相关关系，DKK4高表达可能影响β-catenin在细胞核的积累，这与Wnt信号通路中DKK4作用机制相一致；DKK4蛋白高表达肝癌患者预后生存时间长于低表达者；DKK4蛋白水平的表达水平与患者肿瘤大小、有无包膜具有相关性，这些说明DKK4可能是一种抑癌基因，有可能在肿瘤的增殖与转移中发挥作用，并可作为肝癌预后的一种判断指标。