蛴螬提取物体外对人MGC-803胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡的研究

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目的:探讨蛴螬提取物体外对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用及机制。 方法:应用MTT法、生长曲线、集落形成率的测定和血清药理学实验检测蛴螬提取物对MGC-803胃癌细胞的抗增殖作用及药物敏感性;通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜技术及吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)荧光染色方法检测蛴螬提取物对MGC-803胃癌细胞诱导凋亡和抑制作用的方式;应用免疫组织化学技术(S-P法)检测用药前后凋亡相关基因bcl-2、bax、ki-67的表达改变,探讨蛴螬提取物在体外对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用的可能机制。 结果:(1)用MTT法和生长曲线的检测结果表明,蛴螬提取物在体外对MGC-803胃癌细胞株有明显抑制作用,加药组与对照组相比其生长抑制率有显著性差异(P<0.01),而且这种抑制作用呈现浓度和时间的依赖性。(2)通过集落形成率的测定结果表明,加药组与对照组相比其集落形成率和集落形成抑制率有显著性差异(P<0.01),说明蟒婚提取物对MGC一803胃癌细胞株有明显的抗增殖作用。(3)血清药理学实验结果表明,灌服蟒蜡的含药血清组对MGC一803胃癌细胞株生长抑制率达28.93%,与阴性对照组相比有显著性差异(P<0.01)。(4)光镜及电镜观察结果表明,蟒蜡(终浓度为4mg/ml)作用于MGC一803胃癌细胞24h后,可见胞核固缩、胞核碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化;经AO/EB荧光染色观察结果表明,当终浓度为4mg/m1的蟒嘈作用于MGC一803细胞24h后,其凋亡率和破膜率与自然凋亡率和破膜率相比均有显著性差异,其凋亡率为86.3%(P<0.001),破膜率为41 .9%(P<0 .001)。说明蟒槽提取物确实有诱导MGC一803细胞凋亡的作用,同时也有细胞毒作用,但以诱导细胞凋亡为主。(5)免疫组化结果表明,用药前后凋亡相关基因bel一2、峨一67、bax均有显著性改变(P<0.001)。结论:蟒蜡提取物在体外对人MGC一803胃癌细胞株有显著性抗增殖及诱导凋亡作用,其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制是通过凋亡相关基因bcl一2、ki一67、bas的表达改变有关。本实验结果为蟒蜡的临床应用及深入研究提供了理论及实验依据。
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