大豆抗氧化肽的制备与表征

来源 :河南工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ogl
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究以低温脱脂豆粕为原料,采用优化后的Nagano法分离制备7S和11S大豆球蛋白。选取Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶水解分离得到的7S和11S大豆球蛋白制备抗氧化活性的肽。通过大豆球蛋白酶解液体外抗氧化活性的测定筛选出水解液抗氧化性较高的蛋白酶类,利用正交试验优化了其水解大豆球蛋白的反应条件。在最适水解条件下制备抗氧化活性肽水解物,进行水解产物中抗氧化活性肽的分离,选取抗氧化活性较强的肽组分,利用高效凝胶色谱法分析其分子量分布,并对其氨基酸组成进行分析。利用优化后的Nagano法分离制备7S和11S大豆球蛋白通过SDS-PAGE电泳分析可知,分离得到7S和11S大豆球蛋白的相对纯度分别达到83.68%和87.59%。选取五种蛋白酶分别在各自最适水解条件下水解分离得到的7S和11S大豆球蛋白,水解时间为1h、2h、3h、4h和5h,以保护因子、对DPPH自由基清除率和水解度为指标综合考虑,从五种蛋白酶中筛选出水解大豆球蛋白抗氧化活性较高的酶类为Alcalase碱性蛋白酶,其优化的水解大豆球蛋白的条件为:温度55℃,pH值8.0,加酶量为5%([E]/[S]),底物浓度为4%。随着水解时间的延长,Alcalase碱性蛋白酶对蛋白的水解度在增加,但是水解产物的抗氧化活性是先增大后减小,水解时间为4h时的水解产物体外抗氧化活性最高,7S和11S大豆球蛋白酶解物保护因子分别为1.48和1.46,DPPH自由基清除率分别为60.85%和58.15%。用超滤和凝胶层析对大豆球蛋白水解物中具有抗氧化活性的肽进行分离。水解液用超滤膜分级后,获得了分子量大于30kDa、10kDa-30kDa、5kDa-10kDa和小于5kDa的组分。11S和7S球蛋白Alcalase碱性蛋白酶水解物分子质量小于5kDa组分的多肽分子质量主要集中在1000Da以下,分别占92.92%和87.53%,含量分别约为82.6%和89.1%。通过抗氧化活性和DPPH自由基清除率的测定比较分析,得到小于5kDa组分抗氧化活性最好。经Sephadex G-25凝胶层析对7S和11S大豆球蛋白酶解物超滤后得到的该组分进行进一步分离,得到A、B、C、D四个组分样品中,组分A的抗氧化活性最好,四个组分的抗氧化活性次序依次为A>C>B>D。分别以牛血清白蛋白、VB12和还原型谷胱甘肽为标准物质制作标准曲线,根据凝胶层析标准曲线得到公式Y=-0.0135X+5.1889。由此所得公式大致推算峰A的分子量大概为1068.81 Da。
其他文献
<正>30多年来,黄旭华的人生牢牢地和核潜艇融为一体……2月11日,"感动中国2013年度人物"颁奖典礼揭晓,被誉为"中国核潜艇之父"的黄旭华榜上有名。今年87岁的黄旭华院士,默默
南疆三地州是典型的"边、少、贫、欠"地区,即边疆少数民族聚居地区,贫困欠发达地区,为了解决这一顽症,南疆三地州势必要走一条依靠特色林果业产业化发展来促进经济社会全面发
【题记】$$在抗战的炮火下,在荒岛的风沙中,在深海的惊涛里……$$他走过一生最好的年华,隐姓埋名,青丝变华发。$$是他与他的战友们,以岁月和心血凝铸,为共和国开启了核潜艇的历史新
报纸
在从康德到黑格尔的德国古典哲学中,关于实践理性的探讨出现了以往哲学中未曾出现的双重化道路:一方面,实践理性是统一不同理性形态的基础,在此它以一般意义上的自由为内核,
党的十九大闭幕后,10月30日,自治区人民检察院召开传达贯彻党的十九大精神电视电话会议,全区近万名检察人员通过视频聆听十九大代表潘志荣亲历盛会的所见所闻所感。自治区人民检
报纸
党中央一直重视加强基层党建工作,十九大提出了习近平新时代中国特色社会主义思想,并被确定为马克思主义中国化的最新成果。本文以新时代中国特色社会主义融入基层党建工作为
<正>互联网金融是互联网与金融的有机结合,是借助互联网和移动互联技术,是利用云计算、大数据和搜索引擎等技术实现资金流转和金融信息发布的金融新模式。互联网金融不是互联
Matlab是一种影响大、流行广的科学计算语言,具有功能强、效率高、简单易学等特点,在许多领域得到广泛应用.首先分析了将Matlab语言引入理工科专业课程教学的优点,并以汽车动
名人作为当今社会关注度高、影响力大的群体,对社会公众有极强的影响力。对于服装品牌来说,名人效应更为突出。名人不仅起到了提高服装品牌知名度的作用,而且通过名人某一方
<正>习近平总书记于2013年提出"丝绸之路经济带"和"21世纪海上丝绸之路"的战略构想,为中国的和平发展以及对外经济合作描绘了宏伟蓝图。"一带一路"涵盖的区域十分广阔(涉及60