【摘 要】
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目的：以前期研究中,利用酵母双杂交系统筛选出的与Reticulon3(RTN3)相互作用的蛋白为基础,选取Fibulin5(FBLN5)作为进一步研究的对象,从基因水平,蛋白质水平和细胞水平,对RTN3
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目的：以前期研究中,利用酵母双杂交系统筛选出的与Reticulon3(RTN3)相互作用的蛋白为基础,选取Fibulin5(FBLN5)作为进一步研究的对象,从基因水平,蛋白质水平和细胞水平,对RTN3能否与FBLN5相互作用进行预测和验证。相关研究为探究RTN3蛋白除凋亡功能之外的其他功能提供线索。方法：(1)通过生物信息学的方法,对RTN3蛋白基因序列进行分析,对RTN3基因启动子序列和转录因子进行预测：(2)通过对RTN3和FBLN5蛋白结构进行模拟和分析,对它们的相互作用可能性进行预测；(3)利用免疫共沉淀技术,从细胞水平证实RTN3与FBLN5能否发生相互作用；(4)依据生物信息学的分析结果,构建RTN3蛋白部分片段缺失的载体,为RTN3功能研究提供条件。结果：(1)通过基因序列分析,预测RTN3启动子序列位于47-187bp附近,转录因子为GATA-1;(2)通过蛋白质结构预测,RTN3与FBLN5存在相互作用结构；(3)通过免疫共沉淀实验,证实内源性RTN3与FBLN5可发生相互作用。结论：(1)生物信息学分析RTN3与FBLN5的结构与功能,预测它们能相互作用；(2)证实了RTN3在平滑肌细胞中能够与FBLN5结合。
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