所有生物体都生活在一个动态环境中,应激反应对机体生存至关重要。为了应对内外环境的变化,动物会产生一系列的适应性行为。而这些行为背后的神经分子机制一直是科学家们关注的热点。以慢性应激作为应激源来研究情绪障碍相关疾病背后的分子机制已得到大力发展。在本论文中,我们以果蝇为模式动物,在细胞水平上,研究慢性应激对嗅觉记忆相关神经元活性的影响进而对相关的神经环路进行解析。在本实验室的前期工作中,已经建立了一个慢性应激(重复机械震荡)模型,果蝇经慢性应激处理后也会进入类抑郁状态,表现出行为绝望、学习能力受损、快感缺失、性欲减弱等类抑郁行为。本论文主要研究果蝇认知功能的损伤,为了理解复杂神经网络控制动物行为的过程与机制,需要在细胞水平上对神经活动进行检测和记录,进而解析调控的神经环路。本文的研究工作包括以下两个方面:1、慢性应激影响多巴胺下游神经元的活性本论文通过两种活性检测工具(ANF-GFP和CaLexA)发现,慢性应激并未对果蝇多巴胺神经元活性造成明显的影响,却对蘑菇体KCs以及蘑菇体输出神经元活性产生了较大的作用。慢性应激导致MBON-γ1pedc>α/β被激活,而MBON-γ1pedc>α/β的神经活动对于厌恶性嗅觉记忆的获得和提取都是必需的。在KCs神经元中,果蝇经慢性应激处理之后,α′/β′神经元活性受到了抑制而γ神经元则被激活了。α′/β′神经元对于嗅觉学习记忆的固化是必需的,而γ叶对于短时程记忆的维持是必需的。2、NPF神经元与多巴胺神经元突触连接分析研究结果表明,慢性应激可能会导致NPF神经元P2细胞的NPF启动子活性降低,从而降低NPF表达水平。然而,NPF神经元活性并未发生可检测到的变化。采用trans-Tango、GRASP以及一系列突触标记实验来寻找直接调控多巴胺神经元的潜在上游神经元。我的分析没能发现NPF与DA神经元形成突触的证据;而syb-GRASP分析结果暗示着5-HT神经元可能位于DA神经元的上游而发挥作用。