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背景：受体酪氨酸激酶RON在上皮细胞的生长、分化、增殖等过程中发挥着一定的作用。RON在乳腺，结肠，肺，甲状腺，皮肤，膀胱和胰腺肿瘤等组织中呈高度表达，而在正常上皮组织中呈低表达或不表达。RON的异常表达常伴随变异体产生。变异体RON△160的过度表达是结肠癌细胞的一个特征。RON含有多个功能性的结构域，如胞外的SEMA结构域、PSI基团、IPT单位和胞内的邻膜区、激酶区和C-末端磷酸化位点等。不同的结构域在RON介导的生物学活性中发挥着不同的作用。缺失或截断都会导致RON受体磷酸化活性改变。变异体RON△160缺失胞外段第一个IPT单位，使它具有致瘤性。C-末端位于RON第20外显子，在调节RON活性中发挥两个作用。一方面，其包含一个多功能结合位点—Y1353VQL-PAT-Y1360序列。该位点能招募下游的信号分子，如PI-3K，Smad，Grb2，STAT3等。当RON与特异性配体结合后，该位点的酪氨酸残基发生磷酸化、传导信号。但是包含两个突变位点Y1353和Y1360的突变体RONM1254T显示这个多功能位点对致瘤活性不是必需的。另一方面，体外实验显示整个C-末端对RON激酶活性有自我抑制作用，主要通过是C-末端Tyr1353／1360残基与激酶区Tyr1238／1239残基之间的结合起作用。研究发现C-末端的Tyr1353／1360残基发生突变或被Phe替代后，C-末端与激酶区的结合更加紧密，进一步抑制RON活性。因此，C末端在RON介导的生物学活性中的作用有待于进一步研究。目的：本课题旨在研究RON蛋白在正常人消化道上皮组织及其癌变细胞中的表达状态，同时着重探讨RON-C末端肽段在RON及其变异体RON160所介导的信号传导及致瘤活性中的作用。材料与方法：采用单克隆抗体杂交瘤技术，制备并鉴定数个具有生物学活性的特异性抗RON单克隆抗体。通过免疫组织化学的方法，用抗RON单抗（2F2），检测了RON在正常人消化道及癌症组织中的表达。所用的组织芯片类型包括：正常成人、胚胎及多种消化道肿瘤组织。利用PCR方法构建了C末端缺失的两个RON变异体——RON-CF和RON△160-CF。通过细胞表达、蛋白化学分析、生物学功能及动物体内实验等实验方法，研究了C末端在RON及RON△160在促进细胞侵袭性生长中的一些作用及机理。结果：1、成功制备了特异性抗RON单克隆抗体Zt／g4、2F2和2C6，初步鉴定了它们在免疫组化、ELISA、免疫沉淀、免疫荧光等方面的性状。其中Zt／g4和2F2主要识别RON胞外段，两者都具有激活RON磷酸化的活性。2C6主要识别胞内段，没有明显抑制或激活RON的生物学活性；2、组织芯片的免疫组化结果显示，RON在消化系统的胚胎和成人组织中几乎不表达或呈低水平表达，两者的表达和分布没有明显差异；在食道癌、胃癌、胰腺癌、结肠癌组织中，RON蛋白呈异常表达，其中50％以上的结直肠癌组织中RON为过度表达：3、C末端缺失的RON蛋白呈现明显的生化及生物学功能的异常，主要表现为：1) C末端缺失后导致RON受体无法发生二聚体化，蛋白磷酸化的作用消失；2)在RON介导的信号通路中，C末端缺失后RON／RON△160的自体磷酸化功能丧失、下游信号蛋白（Erk1／2、AKT）的磷酸化也抑制，RON△160介导的细胞浆内β-catenin的积聚的功能减弱；3)C末端去除后导致RON△160介导的细胞增殖、形态改变、迁移和动物体内致瘤效应等活性明显丧失。结论：RON蛋白在正常人胚胎和成人消化道上皮组织中呈微量表达状态，而在部分消化道肿瘤组织，特别是在大肠癌中呈过度表达，提示RON的过表达可能和大肠癌的发生和进展有一定的病理联系。RON蛋白C末端是调节RON生物学功能的重要结构组成部分，通过影响RON受体的磷酸化，调节胞内信号蛋白途经的激活，从而调节细胞的生物学功能。