紫红獐牙菜化学成分的含量测定及体外抗HBV活性物质的筛选

来源 :湖北中医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:susan6918
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的: 筛选紫红獐牙菜抗乙肝病毒的有效部位和化学成分,阐明抗乙肝病毒活性物质基础;建立药材多种有效成分的HPLC含量测定方法,为药材质量评价提供科学依据。 方法: 采用乙肝病毒基因组转染的人肝癌细胞(Hep G2)2.2.15细胞为细胞模型,样品临用前溶于DMSO配成适当浓度,检测时用培养液作2倍或3倍稀释。将2.2.15细胞接种于96孔培养板,24小时后将各浓度梯度的供试品加入96孔板中,同时设不加药物的细胞对照组,各组设3复孔,加药4天后分别更换原浓度含药培养液,加药8天后于显微镜下观察细胞病变,完全破坏为4;75%破坏为3;50%破坏为2;25%破坏为1;无病变为0。按Reed-Muench法计算半数有毒浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0)。同法将2.2.15细胞接种于24孔培养板,24小时后,以最大无毒浓度为最大上样浓度,并将最大无毒浓度作2倍或3倍稀释,共设5个梯度组,同时设不加药物的细胞对照组,各组设3复孔,加药4天后收集培养上清液并更换原浓度含药培养液,加药8天后收集培养上清液和细胞,将培养4天和培养8天的培养上清液采用放免法(RIA)检测药物对表面抗原和e抗原的抑制率,按Reed-Muench法计算半数有效浓度(IC50),然后计算出样品在2.2.15细胞培养内对HBsAg和HBeAg的选择指数(SI)。另将加药8天后收集的细胞用来提取细胞总DNA,采用斑点杂交法检测药物对细胞总DNA的抑制率,按Reed-Muench法计算出半数有效浓度(IC50),并计算出SI。 采用反相高效液相色谱法对紫红獐牙菜的全草及不同部位的五种主要有效成分即獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷、8-O-β-D-吡喃葡萄糖基-1,5-二羟基-3-甲氧基(口山)酮、1,5,8-三羟基-3-甲氧基(口山)酮同时进行含量测定。测定条件为:色谱柱:Alltima C18色谱柱(250×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.05%磷酸水溶液;梯度洗脱:0min,甲醇20%,50min,甲醇80%,55min,甲醇100%;柱温:30℃;流速:1.0ml/min;检测波长:254nm。 结果:
其他文献
近年来,ERP系统及其业务的迅速发展,对传统的企业管理观念和管理模式形成了巨大的冲击。越来越多的企业采用ERP这种先进的集管理和信息技术于一体的管理理论,在实践中取得了
《说文解字》与中国古代文化的关系是一个长期被古今学者关注的研究课题,通过《说文》来探讨古代文化的著作书籍成果颇丰。 本文以东汉许慎的《说文解字》为主要背景资料,
在我国的养老金制度改革的过程中,养老金的保值、增值的问题引起了越来越多的重视。在保证养老基金安全性的前提下,怎样通过投资的方式来实现养老金的增值保值成为了保险公司和
目的分析颈动脉粥样硬化斑块生长部位与血管内膜、血流动力学的相关性。方法选取2005年6月-2012年11月期间我院收治1820例颈动脉粥样硬化患者为研究对象,根据其有无斑块和内
目的探讨血管内超声(IVUS)对冠状动脉弥漫长病变的临床应用价值。方法前瞻性收集2011年5月-2012年03月于我院经冠状动脉造影(CAG)证实存在冠脉弥漫长病变的患者51例,同时对这
目的:总结82例成人手足口病的临床表现,实验室检查和流行病学特点,有利于做好手足口病的预防治疗。方法:对82例成人手足口病的临床表现和流行病学特点进行回顾性分析。结果:
唯物史观是马克思的一个伟大发现。唯物史观的伟大发现在人类思想史上具有开创性意义,它被认为是现时代不可超越的社会历史理论。它不仅科学地提出了系统的社会历史宏观解释
自1999年欧元问世、2002年全面启动以来,法国、德国等欧洲主要国家一直希望英国能够加入欧元区,为推动欧洲一体化做出贡献。而英国政府虽有回应,但无大动作。这两年,随着欧元
本文通过对美国少年司法起源与变迁史的考察发现,无论是多么伪善或者直白,少年司法起源与变迁背后的推动力均主要源自成人社会控制少年的需要;而少年司法政策的演变规律则呈
目的观察和分析99Tcm-奥曲肽显像在淋巴瘤初始分期和再分期中的临床应用价值。资料和方法30例临床高度可疑或已确诊的淋巴瘤患者进行了99Tcm-奥曲肽显像研究。其中28例为初发