【摘 要】
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[目的]:本文旨在研究心肌缺血预适应上调蛋白1(心肌缺血预适应上调蛋白1(Mipu1)对过氧化氢诱导脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬的影响。 [方法]:1.培养HUVECs,免疫印迹检测在不同浓度
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[目的]:本文旨在研究心肌缺血预适应上调蛋白1(心肌缺血预适应上调蛋白1(Mipu1)对过氧化氢诱导脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬的影响。 [方法]:1.培养HUVECs,免疫印迹检测在不同浓度H2O2处理HUVECs和H2O2处理HUVECs不同时间时Mipu1蛋白的表达水平;2.在H2O2处理时中构建Mipu1过表达/干扰细胞模型,然后检测 Mipu1对 HUVECs自噬的影响;3.利用免疫荧光法观察 H2O2处理HUVECs时Mipu1过表达和Mipu1干扰对自噬的影响;4.用倒置荧光显微镜观察Mpiu1表达质粒和GFP-LC3质粒共转染在HUVECs自噬中的作用。 [结果]:1.免疫印迹结果表明:H2O2处理HUVECs6h、12h、24 h组Mipu1蛋白表达水平较对照组明显升高(P<0.05);0.25mmol/L、0.5mmol/L和1mmol/L浓度的H2O2处理HUVECs12h后Mipu1蛋白表达水平与对照组相比明显升高(P<0.05);2. HUVECs过表达 Mipu1后LC3的点蓄积增多;干扰Mipu1表达后HUVECs中LC3点蓄积减少。3.与H2O2组相比,H2O2+Mipu1组中LC3-II和Beclin1表达明显增加,p62表达明显减少(P<0.05);与H2O2组相比, H2O2+shRAN-Mipu1组中LC3-II和Beclin1表达减少,p62表达增多(P<0.05);4.与H2O2组相比,H2O2+Mpiu1+GFP-LC3质粒组LC3聚积明显增加。 [结论]:H2O2可诱导Mipu1表达,过表达Mipu1可以上调HUVECs自噬的活性。
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