【摘 要】
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背景:脓毒症早期起关键作用的是细胞因子。由于TNF-α和IL-1p等为早期一过性释放的致炎因子,因此针对TNF-α或者IL-1p等致炎介质的治疗窗口期非常短暂,并且对于炎症晚期所出现
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背景:脓毒症早期起关键作用的是细胞因子。由于TNF-α和IL-1p等为早期一过性释放的致炎因子,因此针对TNF-α或者IL-1p等致炎介质的治疗窗口期非常短暂,并且对于炎症晚期所出现的脓毒症也显得无能为力。新发现的晚期炎症介质HMGB1,其促炎功能和动力学特点,使得它比一些早期炎症介质更具有潜在临床应用价值。目前很多研究者尝试采用各种措施来拮抗晚期炎症介质HMGB1的表达与释放,并取得了值得肯定的效果。因此我们尝试使用主动免疫的方法,探究主动免疫是否对脓毒症有预防效应。方法:通过分子生物学方法构建人HMGB1原核表达载体,并使用乳糖诱导表达得到重组人HMGB1蛋白;使用重组HMGB1对小鼠进行免疫;间接ELISA方法检测小鼠抗血清效价,并使用效价稳定后的小鼠血清为一抗进行Western blot检测;CLP模型检测免疫小鼠对脓毒症的预防效应;H&E染色确定小鼠器官病理学变化;ELISA检测小鼠血浆中MGB1的含量。结果:构建得到带有His标签的HMGB1原核表达载体(pET28a-His-HMGBl);经乳糖诱导表达得到较纯的可溶重组人HMGB1蛋白;间接ELISA和Western blot检测共同确定小鼠经免疫后抗血清效价达到稳定;CLP模型检测发现,免疫组小鼠存活率显著提高,组织器官得到有效保护,且血浆中HMGB1含量较未免疫组小鼠有显著下降。结论:重组人HMGB1蛋白免疫后对小鼠脓毒症有预防效应,这为进一步探究主动免疫预防脓毒症奠定了基础。
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