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目的：
获得高纯度重组Derfcofilin，并对其进行免疫学特性鉴定和致敏性研究。方法：
根据反转录试剂盒提供的实验方法，对尘螨RNA进行反转录，并通过特异性引物获得Derfcofilin基因。将Derfcofilin酶切后与pET-28a构建原核表达质粒，并在大肠杆菌中在IPTG的诱导下获得大量表达，经亲和层析获得大量重组蛋白。用临床皮试，过敏患者外周血IgE检测实验和动物实验研究Derfcofilin的致敏性。
结果：
Derfcofilin包含447个核苷酸，编码113个氨基酸。将Derfcofilin氨基酸序列与其它物种氨基酸序列对比，发现粉尘螨cofilin与含羞草Stemcofilin(NCBI检索号：KFM71703.1),芥螨Sarscofilin(NCBI检索号：KPM08623.1),黑寡妇蜘蛛Lathcofilin(检索号：ADV40203.1),金缕梅Lycscofilin(NCBI检索号：ABX75507.1)and肩突硬蜱Ixoscofilin(NCBI检索号：XP_002435134.1)的序列相似性较高，分别有87%、97%、84%、84%和74%的序列相似性。Derfcofilin在Escherichiacoli菌中进行表达，经纯化后获得高纯度重组蛋白。30.2%粉尘螨过敏患者对Derfcofilin皮试阳性，其血清检测说明血清中含有DerfcofilinsIgE。小鼠动物实验发现，Derfcofilin能诱导小鼠产生气道高反应和Th2免疫反应。
结论：
成功获得较高纯度的重组Derfcofilin蛋白，Derfcofilin被证实为粉尘螨新组分过敏原，能诱导小鼠产生Th2免疫反应和过敏性哮喘症状。
获得高纯度重组Derfcofilin，并对其进行免疫学特性鉴定和致敏性研究。方法：
根据反转录试剂盒提供的实验方法，对尘螨RNA进行反转录，并通过特异性引物获得Derfcofilin基因。将Derfcofilin酶切后与pET-28a构建原核表达质粒，并在大肠杆菌中在IPTG的诱导下获得大量表达，经亲和层析获得大量重组蛋白。用临床皮试，过敏患者外周血IgE检测实验和动物实验研究Derfcofilin的致敏性。
结果：
Derfcofilin包含447个核苷酸，编码113个氨基酸。将Derfcofilin氨基酸序列与其它物种氨基酸序列对比，发现粉尘螨cofilin与含羞草Stemcofilin(NCBI检索号：KFM71703.1),芥螨Sarscofilin(NCBI检索号：KPM08623.1),黑寡妇蜘蛛Lathcofilin(检索号：ADV40203.1),金缕梅Lycscofilin(NCBI检索号：ABX75507.1)and肩突硬蜱Ixoscofilin(NCBI检索号：XP_002435134.1)的序列相似性较高，分别有87%、97%、84%、84%和74%的序列相似性。Derfcofilin在Escherichiacoli菌中进行表达，经纯化后获得高纯度重组蛋白。30.2%粉尘螨过敏患者对Derfcofilin皮试阳性，其血清检测说明血清中含有DerfcofilinsIgE。小鼠动物实验发现，Derfcofilin能诱导小鼠产生气道高反应和Th2免疫反应。
结论：
成功获得较高纯度的重组Derfcofilin蛋白，Derfcofilin被证实为粉尘螨新组分过敏原，能诱导小鼠产生Th2免疫反应和过敏性哮喘症状。