姬松茸(Agaricus blazei Murill)是一种原产自巴西的药食两用型真菌,它属于担子菌亚纲、层菌纲、伞菌目、蘑菇科。目前人们对它的研究多集中在其多糖的分离纯化,对结构和生物活性研究较少。本课题以姬松茸为原料,研究了姬松茸水溶性多糖的分离纯化、结构鉴定和生物活性,为之后开发相关保健产品和进一步的理论研究供依据。主要研究内容和结果如下:(1)对姬松茸多糖进行了初步取和纯化过程,并进一步分析了纯化多糖ABD的理化性质。通过热水浸、sevage法除蛋白、反复醇沉之后得到了姬松茸粗多糖,得率为18.69%,其中糖含量仅为47.50%;经过DEAE-sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱进一步纯化后得到了一种纯化多糖ABD,糖含量达到了93.09%。经凝胶反相渗透色谱和冻融分析鉴定其为单一组分多糖,重均分子量为2058 kDa;经过理化性质分析得出,ABD中不含有淀粉,含有极微量的蛋白质和糖醛酸,是一种中性的多糖。(2)采用红外光谱、核磁共振、酸水解、甲基化等手段分析了多糖ABD的结构特性。经过红外分析,在3389 cm-1处、2935 cm-1处和1300~1000 cm-1范围有吡喃糖环多糖基团的特征吸收,在929 cm-1和853 cm-1处分别有α型和β型糖环的特征吸收;经过高效液相分析其单糖组成及比例,结果显示其中葡萄糖∶半乳糖∶岩藻糖∶甘露糖=83.59∶5.46∶1.04∶0.59;经过核磁共振和甲基化以及高碘酸氧化等手段分析,在ABD中可能是由α-1,3-D-Glc、α-1,4-D-Glc和β-1,3-D-Gal构成主链,侧链可能是β-1,3-D-Glc和α-1,6-D-Glc等组成,分支点为α-1,2-L-Man或者α-1,2-L-Fuc;通过I2/KI实验证明其中含有较多的分支或侧链;通过刚果红试验证明ABD并没有三螺旋的空间构象;热重分析证明ABD多糖具有较好的热稳定性,玻璃态转化温度和热裂解温度分别为65.6℃和305.0℃。(3)对多糖ABD的抗氧化性能进行了研究。通过Fe还原力试验测定了ABD对三价Fe的还原能力;通过DPPH自由基清除率测定了ABD对自由基的抑制作用;通过ORAC值的测定来表征了ABD多糖对活性氧的总抗氧化能力,结果表明ABD多糖具有一定的抗氧化能力且在高浓度时效果较好。(4)选用三种癌细胞(Hela、MCF-7和HepG-2)进行了ABD多糖的体外抗癌实验,选用高中低三种剂量分别作用于三种癌细胞,结果表明在中低剂量时ABD多糖对三种癌细胞抑制率相近,而高浓度时对MCF-7和HepG-2的抑制效果明显高于对Hela的抑制效果。(5)测定了ABD多糖的免疫作用和抗炎效果。选用小鼠腹腔巨噬细胞构建细胞模型,进行了体外的免疫和抗炎实验,测定了NO、TNF-α和IL-6的分泌情况。结果证明ABD多糖不仅能够增强巨噬细胞吞噬能力和分泌促炎症因子,起到升免疫力的作用;而且在LPS诱导炎症反应过度时可以降低促炎症因子的分泌,抑制炎症进一部扩大,起到抗炎做用。ABD多糖具有双向调节免疫功能的效果,能够维持免疫系统的平衡。新型的姬松茸多糖ABD是一种主要由葡萄糖和半乳糖组成的高分子量中性多糖,热稳定性好,不含有三螺旋空间构象,具有一定的抗氧化能力和体外抗癌能力,可以双向调节免疫功能,维持免疫系统的平衡。