N-甲基转移酶作为万古霉素生物合成中重要的后修饰酶，目前少有研究报道。本实验室通过基因组文库的构建获得了万古霉素的生物合成基因簇，对其进行生物信息学分析后推测vcm12可能为编码N-甲基转移酶的基因。本研究以本实验室构建的用于vcm12基因表达的工程菌E.coliBL21(DE3)/pLYLH13为出发菌株，体外诱导表达重组蛋白Vcm12，进行体外酶催化反应，初步考察了体外酶活反应的底物浓度与转化效率的关系，研究了N-甲基转移酶体外酶催化反应的底物宽泛性，发现万古霉素生物合成基因vcm12编码的N-甲基转移酶有一定的底物特异性。　　 在Vcm12体外活性研究中共获得了4个万古霉素类似物LYV09G01、LYV07R05、LYV09G02、LYV08LH02和3个替考拉宁类似物甲基TA2-1—甲基TA2-3，根据LC-MS分析，推测LYV09G01、LYV07R05、LYV09G02分别为N-甲基无氯万古霉素、N-甲基脱万古糖胺万古霉素、N-甲基-6-万古糖胺万古糖苷，根据波谱解析确证LYV08LH02为N-甲基万古糖苷，经检索分析，推断这4个万古霉素类似物均为新化合物，而甲基TA2-1—甲基TA2-3已有文献报道；对N-甲基万古糖苷进行了体外生物活性研究，发现其抗菌活性略低于万古霉素；4个新的万古霉素类似物可为杂合万古霉素的研究提供不同的母核。　　 构建了东方拟无枝酸菌HCCB10007中推测的C3-甲基转移酶基因vcm11、N-甲基转移酶基因vcm12的敲除质粒，可用作以后接合转移工作的载体。