目的:口腔鳞状细胞癌（OSCC）是头颈部肿瘤中是最为常见的类型之一,局部复发、颈部淋巴结转移及较晚的临床分期被认为是引起不良预后的主要原因。白介素-17（Interleukin-17）作为肿瘤炎性微环境的重要组成部分,在多种恶性肿瘤中的重要作用已被证实,已有研究发现在OSCC中,IL-17由存在于肿瘤微环境中的多种细胞所分泌,并对OSCC的侵袭、转移发挥重要作用,但目前尚缺乏其详细机制的报道。既往研究发现OSCC中肿瘤出芽（Tumor budding）的表现情况与其预后密切相关,然而其机制尚不明确。本研究拟通过生物信息学分析、IL-17结合肿瘤出芽与OSCC预后的相关性分析、及IL-17影响OSCC肿瘤细胞侵袭力的研究,为OSCC预后评估提供新的参考因素及机制研究基础,并探讨IL-17对OSCC侵袭力的调控效应及其作用机制。材料与方法:在GEO数据库中选取三组口腔鳞癌数据集,通过分析获取差异表达基因（DEGs）后,分别进行基因本体论（Gene Ontology）、通路富集分析及蛋白互作网络分析（PPI）,筛选出可能影响OSCC的候选基因及信号通路。纳入110例OSCC临床病例,分别取肿瘤、肿瘤切缘及正常组织,ELISA法检测各组织中IL-17表达水平;通过HE染色及免疫组化染色组织切片,评估肿瘤侵袭前缘中IL-17表达水平及肿瘤出芽的状态,以及其与OSCC预后指标的相关性。通过流式筛选CD44+/ALDH1+及CD44—/ALDH1—口腔鳞癌细胞株,并通过体内/外实验观察两种细胞增殖,克隆形成,迁移/侵袭,以及裸鼠皮下成瘤能力的差异,以及加入外源性IL-17后,低侵袭潜能亚群细胞侵袭能力的变化。通过免疫印迹、聚合酶链式反应等技术检测IL-17调控口腔鳞癌侵袭力中的作用及机制。结果:通过对三组口腔鳞癌数据集的分析,共获得129个差异基因（DEGs）,经过基因本体论（Gene Ontology）、通路富集分析及蛋白互作网络分析（PPI）后,发现STAT,SPARC,APP,SNAI2,CXCL8,MMP13,SPP1,COL1A2,ITGA6和IFI27等基因在口腔鳞癌组织中明显升高,并在PPI网络中处于关键位置,且细胞外基质-受体相互作用、肿瘤内通路、肿瘤内转录失调、PI3K-Akt-m TOR及Jak-STAT等信号通路在鳞癌组织中明显富集,进一步分析发现,IL-17-STAT3通路可在OSCC的进展中具有重要作用。临床相关性分析中,ELISA实验结果显示与正常组织相比,IL-17在肿瘤及肿瘤切缘中的表达均明显升高;与肿瘤相比,IL-17在肿瘤切缘中的表达略有升高,但无显著性差异。通过观察免疫组化染色切片,同样发现IL-17在肿瘤及肿瘤切缘当中表达升高;且IL-17表达水平与肿瘤出芽的状态呈正相关关系;当侵袭前缘处的IL-17表达及肿瘤出芽均呈高水平时,对应患者的局部复发率较高、预后较差。通过流式分选口腔鳞癌细胞后,经免疫印迹检测、细胞增殖、迁移/侵袭、克隆形成等体外实验发现,CD44+/ALDH1+亚群细胞的侵袭力高于CD44—/ALDH1—亚群细胞,可分别被认为是具有高/低侵袭潜能的口腔鳞癌亚群细胞。加入外源性IL-17后,CD44—/ALDH1—亚群细胞迁移/侵袭、克隆形成、裸鼠体内成瘤等能力明显提高,此结果提示IL-17可能对口腔鳞癌细胞的侵袭能力具有促进作用。通过免疫印迹检测发现,加入外源性IL-17后CD44—/ALDH1—亚群细胞内磷酸化STAT3（p-STAT3）、vimentin、N-cadherin表达水平显著升高,E-cadherin表达降低,而加入STAT3抑制剂（Stattic）后,不但已经提高的细胞迁移/侵袭能力有所降低,vimentin、N-cadherin表达水平也显著降低。免疫印迹、聚合酶链式反应及细胞迁移/侵袭能力实验提示,在口腔鳞癌细胞中加入IL-17后,STAT3的表达水平升高,且阻断STAT3能够降低肿瘤细胞的侵袭能力。以上结果提示,IL-17-STAT3能够对口腔鳞癌侵袭力具有重要调控作用。结论:在口腔鳞癌中,IL-17结合肿瘤出芽可以对患者的预后情况进行预测;IL-17还可以通过STAT3来调控肿瘤细胞侵袭能力,在肿瘤进展中发挥重要作用。因此,通过合适手段靶向IL17-STAT3可能为口腔鳞癌的综合治疗提供新的思路。