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犬冠状病毒(Canine coronavirus,CCV)是引起犬胃肠炎的主要病原之一,1971年首次由Binn等从腹泻的德国军犬中分离到。近年来,世界上相继有CCV感染的研究及新病毒株分离的报道。我国于1985年证明有CCV的流行,但有系统的研究报道很少。 本试验用MDCK细胞从86头混合感染犬中的21头病死犬肠道病料中分离到两株病毒,经理化学鉴定、动物复归实验、电镜检查、PCR检测证明为CCV和犬腺病毒2型(Canine adenovirus 2,CAV2),定名为CCV-KM和CAV2-KM。动物试验表明,CCV-KM对幼犬有较强的致病性。基因测序结果表明,CCV-KM的M基因213bp序列同GenBank登录的FCoV-likc CCV同源性最高(95.3%)。 采用套式PCR(nested polymerase chain reaction,n-PCR)技术,对40份2000年至2004年收集的发病死亡犬肠道病料和137份2003年12月至2004年4月采集的各地犬群粪便样品进行CCV检测,结果显示,发病死亡犬病料CCV阳性率为20%(8/40),其中8份CCV阳性样品中有5份是同其它病毒混合感染。采集的三个城市健康犬群粪样中,昆明犬群最高为93.1%(27/29),沈阳犬群为87.2%(34/39),南京犬群CCV阳性率为73.1%(38/52)。不同年龄犬群粪便的CCV阳性率差异显著,2月龄的为89.5%,3~12月龄的为85.1%,均高于成年犬(57.1%)。南京地区17头犬间隔2个月的粪便CCV阳性率和CCV血清中和抗体效价无显著差异。