脂肪代谢因子在PCOS中的表达及与颗粒细胞凋亡水平的相关研究

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目的:本课题拟研究PCOS患者在超排卵周期中卵泡液内脂肪代谢因子瘦素、脂联素、胰岛素样生长因子Ⅰ、生长激素在PCOS中的表达,并探索它们与黄素化颗粒细胞凋亡和助孕结局的相关性,以了解辅助生育助孕过程中PCOS患者卵泡液局部内环境中脂肪代谢因子的变化及其对卵子质量和IVF助孕结局产生的可能影响,为PCOS导致的不孕患者的诊断和治疗提供指导。方法:本研究选取因多囊卵巢综合征行体外受精-胚胎移植助孕的患者40例为实验组,同期病因为单纯输卵管因素或者男性因素的患者40例为对照组,采用酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测PCOS组和对照组取卵时卵泡液中瘦素、脂联素、胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、生长激素(GH)的水平,并用化学发光法测定PCOS组和对照组卵泡液和月经第2-4天血清E2、P、T、FSH、LH、PRL的浓度以及注射hCG日血清E2、P、LH、PRL水平。留取对照组卵泡液的同时收集其中的颗粒细胞,采用原位末端凋亡法(TUNEL)检测颗粒细胞凋亡率。并用免疫组化法检测颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:1.PCOS组中,不同超排方案的Gn用量均少于正常对照组,卵泡液中瘦素水平比对照组低,差异有统计学意义;2.卵泡液中的瘦素水平与Gn用量、卵泡液中FSH水平呈正相关,卵泡液瘦素水平随着Gn用量的增加而升高;3.卵泡液中脂联素水平与雄激素浓度呈正相关,与卵子成熟率呈负相关;4.未发现PCOS组和对照组之间卵泡液中GH水平存在差异,长方案超排时PCOS组卵泡液中IGF-Ⅰ高于对照组,差异有显著统计学意义,且IGF-Ⅰ与IVF受精率呈正相关,短方案超排时IGF-Ⅰ水平组间没有差别;5.对照组卵泡液中颗粒细胞凋亡率在2%-28%之间,按照不同的病因、促排方案、Gn用量、乃至妊娠结局分组,组间没有显著的差别;6.颗粒细胞凋亡率与卵母细胞成熟率呈负相关;7.通过回归分析,提示颗粒细胞凋亡率随hCG日孕激素水平的升高而升高,卵母细胞成熟率随颗粒细胞凋亡率、体重指数的升高而下降。结论:1.PCOS患者行超排卵治疗后卵泡液中瘦素水平低于对照组,且瘦素水平随Gn用量增加而上升,说明瘦素的含量与超促排卵过程中卵巢对药物的反应性有关;2.脂联素在卵泡液中与雄激素呈正相关,与卵母细胞成熟率呈负相关,提示脂联素通过增加雄激素水平来降低卵母细胞成熟率;3.研究结果没有发现卵泡液中GH水平存在显著差别,但长方案超排时PCOS组的IGF-Ⅰ水平高于对照组,并与IVF受精率呈正相关,可能血清和卵泡液内因子的含量和作用存在差异,IGF-Ⅰ对受精率的影响还需进一步探讨;4.颗粒细胞凋亡率与卵泡液中的细胞因子、激素及妊娠结局没有相关性,也许是多因子共同作用的结果,也可能与标本量不足有关;5.hCG日孕激素是颗粒细胞凋亡率的预测指标,颗粒细胞凋亡率与体重指数能预示卵母细胞的成熟率。
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