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盐霉素是由白色链霉菌（Streptomyces albus）产生的聚醚类动物专用抗生素,作为抗球虫剂在世界范围内得到普及,特别是其高效广谱性、低耐药性和低残留,对肉鸡、猪、牛等增重效果显著等特点得到养禽业的认可。 国内于90年代初开始生产盐霉素。由于发酵单位低,造成成本高,质量差,产品缺乏竞争力。而通过菌种改良和发酵工艺优化,提高发酵单位、降低成本的有效手段。 本文建立了分光光度法测定发酵培养基中脂肪酸、豆油和发酵液中脂肪酶活力的方法。脂肪酸与Cu2+在一定条件下形成淡绿色化合物,在715nm处有最大吸收。通过测定发酵液中脂肪酸和发酵液中豆油水解生成的脂肪酸及其变化,可计算出豆油含量和酯酶活力。 建立了高效的高产菌株筛选方法。盐霉素的合成途径为聚多酮途径,起始单位是三碳单位丙二酰CoA。以植物油或动物油作为培养基碳源能提供更多的三碳和二碳单位,有利于盐霉素的合成。通过比较具有不同生产能力的盐霉素产生菌的脂肪酶活力,发现酯酶活力与盐霉素发酵单位呈正相关的关系,高产菌株具有较高的脂肪酶活力。以脂肪酶活力为初筛指标筛选盐霉素高产菌株,可大大提高获得盐霉素高产菌株的几率。出发菌株纯化后,经紫外线和氯化锂复合诱变处理,在含豆油的固体培养基上以豆油水解圈直径与菌落直径的比为指标进行初筛,选出水解圈直径与菌落直径的比大的菌珠。再通过摇瓶复筛,从中筛选出盐霉素高产菌株。所筛选出的菌株发酵水平比出发菌株提高了13.5%。该筛选方法比传统的方法,减少初筛工作量,提高了筛选效率。 对筛选出的盐霉素高产突变株,进行生理特性考查。结果发现,该菌株遗传稳定,生长快,酯酶活力高,对氧的需求低。 对发酵工艺进行了优化。包括接种时间、接种量,发酵培养基,发酵过程中培养基pH调控,豆油的补加,特别对发酵过程中培养基pH,调控和豆油的补加工艺进行了详细研究。根据发酵液中的脂肪酸和豆油浓度,计算出补油量,使发酵水平由20000u/ml左右提高到25000u/ml左右。发酵过程中用NaOH调节pH到6.0左右,