研究目的:系统性红斑狼疮是一种慢性系统性自身免疫病,血清中高滴度的抗双链DNA抗体是诊断特异性的致病抗体。系统性红斑狼疮的发病机制目前尚未完全阐明,一般认为基因和环境因素在发病中都起到了重要作用。肠道微生物作为环境因素的一种,在系统性红斑狼疮发病中的作用仍不明确。本研究的主要目的是明确肠道微生物在系统性红斑狼疮发病中的作用及其病理生理机制,为疾病发病机制研究和疾病治疗提供理论依据。方法:我们收集系统性红斑狼疮患者和健康人粪便、狼疮小鼠和健康小鼠粪便,利用16s rDNA测序技术对粪便中肠道微生物组成和差异情况进行分析;将收集到的粪便利用菌群移植的技术处理悉生小鼠,进行微生物定植情况和差异物种分析;ELISA检测血清中疾病特异性抗体滴度,并用流式细胞术分析淋巴细胞在肠道黏膜免疫器官和外周免疫器官中的分布;利用宏基因组学、代谢组学和微生物代谢表型鉴定系统分析肠道微生物基因功能差异以及代谢方面差异;利用转录组测序和荧光定量PCR技术分析肠道微生物对宿主基因表达的影响,鉴定差异基因并进行功能分析。结果:狼疮人群、狼疮小鼠相比各自的健康对照,肠道微生物组成、物种丰度和多样性不同;菌群移植可以使大部分供体肠道微生物定植在悉生小鼠体内,受体悉生小鼠的部分组间差异物种与供体一致,狼疮患者和狼疮小鼠粪便可以引起受体悉生小鼠狼疮特异性自身抗体滴度显著升高;经过狼疮患者和狼疮小鼠粪便处理的悉生小鼠,黏膜免疫和外周免疫应答水平显著高于健康粪便处理的悉生小鼠;宏基因组学对狼疮肠道微生物基因功能分析发现狼疮的肠道微生物碳水化合物和氨基酸转运和代谢功能具有显著差异,代谢组学和微生物代谢表型鉴定分析发现组氨酸代谢具有显著差异;转录组学分析发现狼疮粪便处理的悉生小鼠差异基因功能主要在干扰素Ⅰ型应答以及物质代谢通路中;荧光定量PCR技术验证了狼疮易感基因在狼疮粪便处理的悉生小鼠中表达水平显著升高。结论:肠道微生物参与了系统性红斑狼疮的发病,粪菌移植后狼疮处理组悉生小鼠的血清中疾病特异性抗体含量显著增加,机体炎症免疫应答水平、物质代谢通路等出现显著差异,狼疮发病风险上升,狼疮易感基因表达水平显著上升。综合而言,肠道微生物参与了系统性红斑狼疮的发病。研究目的:高血压是世界范围内最常见的心血管疾病之一,目前关于高血压发病具体原因和机制仍未阐明。我们前期的研宄结果中发现原发性高血压患者人群中,肺炎克雷伯杆菌丰度显著升高,与高血压发病呈现强相关性。本研宄目的是明确肺炎克雷伯杆菌在高血压发病中的作用,并对其作用的病理生理机制进行探索,为高血压的发病机制提供理论依据。方法:我们利用菌群移植技术,将克雷伯菌和乳酸杆菌分别移植到悉生小鼠中,使用无创血压检测和植入式遥感监测分析小鼠血压情况,使用M型超声检测小鼠左心室功能相关指数;使用HE染色分析肠组织学水平变化情况;利用流式细胞术分析淋巴细胞在黏膜免疫器官和外周免疫器官中的分布;利用转录组测序和荧光定量PCR技术分析肠道微生物对宿主基因表达的影响,并对差异基因表达情况进行验证和筛选;使用Western blot技术检测差异基因编码蛋白在组织中的表达。结果:克雷伯菌处理的悉生小鼠血压水平显著上升,左心室重量显著增加,肠组织学有显著类似炎症反应变化;淋巴细胞分布结果表明其黏膜免疫和外周免疫应答水平显著上升;结合转录组测序和荧光定量PCR检测验证差异基因,发现Ponl基因及其编码的PON1蛋白在各组织中的表达出现不同程度下降,高血压发病风险增加。结论:肺炎克雷伯杆菌能够促进高血压发病,可能是通过影响P0N1参与的信号通路使高血压发病风险增加。