老龄大鼠心功能及MicroRNA-1、MicroRNA-133a表达的改变

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背景:年龄被认为是心血管系统疾病发生及发展的主要危险因素之一,大量的研究表明随着年龄的增长,心血管结构发生改变,导致心血管系统功能改变,进而导致疾病的发生。MicroRNA是一类小分子非编码RNA,在体内众多生理及病理过程发挥着调控作用,参与细胞分化、增殖、凋亡及多种疾病的发生发展过程。近期的相关研究表明mircoRNA在心血管系统老化过程中发挥调控作用。目的:本研究旨在研究年龄对心血管系统形态、结构以及生理功能的影响,老化过程中与凋亡相关蛋白以及mircoRNA-1、microRNA-133a含量的变化,为老龄对心血管系统结构及功能的影响及特定mircoRNA参与心脏老化的过程提供科学的实验证据。方法:选择月龄不同F344BN大鼠,按月龄分为30月组,6月及26月对照组,每组各8只大鼠。大鼠称重后,在轻度的麻醉下经胸壁行心脏超声检查。然后处死大鼠,并取其心脏并称重,后将大鼠左心室切成两部分,心室近心房部分采用Western blot技术对心肌组织凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax、Akt等进行测定,左心室近心尖部分采用qReal-TimePCR技术对mircoRNA-1、microRNA-133含量进行半定量测定,从心脏结构、功能、凋亡相关蛋白含量以及microRNAs含量等方面分别进行比较,进而检测老龄心血管系统与mircoRNA-1、microRNA-133a的关系。结果:与6月龄组大鼠相比,26月龄及30月龄组大鼠体重及心脏质量都明显增加(P<0.05)。与6月龄组大鼠相比,30月龄组大鼠心脏质量指数明显增加(P<0.05)。30月龄组大鼠收缩期左室后壁厚度较6月龄组大鼠明显增加(P <0.05)。与6月龄组大鼠相比,26月龄组和30月龄组大鼠射血分数(EF)及短轴收缩率(FS)均降低,而且30月龄组较6月龄组大鼠射血分数(EF)及短轴收缩率(FS)明显降低(P<0.05)。与6月龄大鼠相比,26月龄及30月龄大鼠心肌中总Caspase-3的含量明显降低(P<0.05),分别降低了15.79%和25.28%。与6月龄大鼠相比,30月龄大鼠的Caspase-319kDa片段增加了367.24%(P <0.05),Caspase-317kDa片段增加了225.94%(P<0.05)。与6月龄大鼠相比,30月龄大鼠的Bax增加了36.48%,而各月龄组Bcl-2的含量无明显变化。总Akt及磷酸化的Akt(Ser473)含量在各月龄组之间无明显差异。与6月龄大鼠及26月龄组大鼠相比,30月龄组大鼠心肌组织中miR-1的表达水平明显升高(P<0.05),miR-133a的含量明显降低(P<0.05)。结论:老龄时大鼠心脏的形态出现退行性改变,心脏的收缩功能降低;老龄时大鼠心肌组织中凋亡相关蛋白含量明显改变,提示老龄心脏凋亡明显增加;MicroRNA-1和microRNA-133a参与了老龄大鼠心脏的凋亡过程。
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