小地老虎 Agrotis ipsilon(Hufnagel)属鳞翅目(Lepidoptera)夜蛾科(Noctuidae),是一种世界性的农业生产害虫。长期以来,防治小地老虎以化学防治为主,但由于其迁徙能力强,抗药性发展速度快,传统杀虫剂的防治效果大大降低,为害程度日趋严重。而化学感受蛋白在昆虫的嗅觉机制中起到至关重要的作用,可以结合化学信息分子并进行运输,参与昆虫寻找寄主和取食的过程。因此,以化学感受蛋白功能研究为切入点对研究开发新的高效、环保、绿色的防治方法及技术有重要意义。本研究主要通过运用一系列的分子生物学技术和手段,分别从不同水平对小地老虎3种化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)的表达及功能特性进行系统性的探究,以期阐明AipsCSP8、AipsCSP9及AipsCSP10的功能以及在长期防治小地老虎过程中其可能进化出的新的功能特性,为未来有效防控治理小地老虎提供新型高效、绿色环保的靶标途径。本研究主要结果如下:1.小地老虎Aips CSP8、AipsCSP9及AipsCSP10基因在雌雄成虫中的组织表达谱通过qRT-PCR实验,测定小地老虎AipsCSP8、AipsCSP9及AipsCSP10基因的组织表达谱,其结果显示AipsCSP8基因在小地老虎雄成虫的足和下唇须中表达量最高,在附腺和触角中的表达量次之;在雌成虫的触角中表达量最高,在足、性腺、下唇须中的表达量次之。AipsCSP9、AipsCSP10基因在雌、雄成虫中则表现出表达的特异性,其在触角中的表达量显著高于其他组织。2.小地老虎AipsCSP8、AipsCSP9及AipsCSP10基因在雌雄虫触角中的时空表达谱通过qRT-PCR实验,测定小地老虎AipsCSP8、AipsCSP9及AipsCSP10基因在雌、雄虫触角中的的时空表达谱,其结果显示AipsCSP8基因在雄、雌虫羽化前1天和羽化当天达到顶峰,AipsCSP9、AipsC,SP10基因表达量自羽化前开始逐渐增加,至羽化后逐渐达到顶峰,AipsCSP9基因表达量自羽化后1天至羽化后6天均无明显差异,AipsCSP10基因表达量自羽化后第0天之后均无明显差异。.3.小地老虎AipsCSP9及AipsCSP10在雌雄虫触角感器中的表达模式通过原位杂交实验以及免疫组织化学实验表明,小地老虎AipsCSP9、AipsCSP10蛋白均在雌、雄成虫触角上的毛形感器中有表达,且未发现两个CSPs蛋白存在共表达情况。4.小地老虎AipsCSP8、AipsCSP9及AipsCSP10的结合特性通过荧光竞争结合实验发现,AipsCSP8重组蛋白与寄主植物挥发物邻苯二甲酸二丁酯、苯乙醛以及化学农药阿维菌素有结合能力,AipsCPS9重组蛋白与寄主植物挥发物邻苯二甲酸二丁酯以及化学农药阿维菌素、虫酰肼、啶虫脒、噻虫嗪有结合能力,AipsCSP10重组蛋白与性信息素(Z)-5-癸烯-1-醇、醋酸(E)-11-十四烯酯以及化学农药虫酰肼、啶虫脒有结合能力。以上结果表明,AipsCSP8、AipsCSP9及AipsCSP10不仅在感受性信息素及寄主植物挥发物方面可能存在功能,随着化学农药的使用,还可能在小地老虎识别化学农药过程中发挥着一定功能。通过对小地老虎3个化学感受蛋白AipsCSP8、AipsCSP9及AipsCSP10的表达和功能特性的探究,测定了小地老虎3个化学感受蛋白的组织表达谱及时空表达谱,明确了其在雌、雄成虫触角感器中的表达模式,同时通过将性信息素及植物挥发物作为待测配体的基础上增加化学农药杀虫剂作为待测配体进行实验,阐述了 3个化学感受蛋白在小地老虎识别外界化学刺激过程中可能存在的功能,结果表明小地老虎3个化学感受蛋白可能参与小地老虎嗅觉行为,并在小地老虎感受化学农药过程中发挥作用,其中AipsCSP8还可能参与小地老虎的味觉识别过程。