研究背景：子宫颈癌(Cervical cancer)是严重威胁女性健康的恶性肿瘤之一，其病因尚不明确，目前认为与早婚、性生活过早及混乱、早年分娩、多产、吸烟、经济情况差、地理环境、病毒感染等因素有关，其中最主要的因素是高危型人乳头瘤病毒(high risk-human papillomavirus,HR-HPV)的慢性持续性感染，但具体分子机制尚未完全阐释清楚。近年来，由于人们健康意识的上升，针对子宫颈鳞癌癌前病变的普查较以往更加普及，子宫颈鳞癌的发生率较以往有下降趋势，但在调查中发现越来越多的年轻女性被诊断患有子宫颈鳞癌，所以对子宫颈鳞癌的研究应该更加受到关注。一般来说，宫颈癌出现典型症状两到三个月后，大部分患者就己发展为癌症晚期。对于宫颈癌来说，早期诊断，是宫颈癌的治疗和预后取得良好效果的重要条件。近些年来对宫颈癌的基础研究进展很快，我们了解到宫颈癌的发病过程比较复杂，是关系到多种原因和多种基因共同参与的复杂过程，同时，有许多新的观点在研究过程中被提了出来。上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)，是指上皮细胞在特定的生理和病理情况下向间充质细胞转分化的现象，目前EMT被看成导致肿瘤进展的病理过程，与侵袭和转移有一定关系。在EMT的过程中，细胞之间的粘附减少，上皮细胞极性丧失，与周围基质细胞的接触减少，细胞迁移和运动能力增强，同时细胞表型发生改变，丧失上皮表型，如角蛋白丝，E-钙粘蛋白(E-cadherin)，而获得间质表型，如波形蛋白(Vimentin)，纤维连接蛋白，N-钙粘蛋白（N-cadherin）等。研究发现，在某些上皮性癌如口腔鳞状上皮癌、泌尿上皮肿瘤、胰腺癌中有上皮性钙粘蛋白(E-cadherin)低表达或失表达，而神经性钙粘蛋白(N-cadherin)异常表达，同时增强了癌细胞的侵袭和转移能力；在这些上皮癌中可能存在E-cadherin向N-cadherin转化，并认为这是EMT的一个重要机制。此钙粘蛋白转化增加了癌细胞的侵袭转移性，也为肿瘤的治疗提供了新的靶点和策略。EMT过程中，一个重要分子事件是钙粘蛋白表达的异常，其中E-cadherin和N-cadherin是与肿瘤转移关系最密切的两种钙粘蛋白类型，但二者在肿瘤浸润转移中的作用却相反。E-cadherin促进细胞的粘附聚集、维持上皮形态结构完整性，对维持细胞极性和参与分化调节也至关重要。N-cadherin在上皮组织中的异位表达可以影响上皮细胞的形态和行为，诱导其向间质转化，即产生EMT。p63是近年发现的p53家族的成员之一，p63在各种上皮组织的发育、分化和形态的发生上都起着重要的作用，对于胚胎形成过程中外胚层的发育有着重要的意义。目前研究认为p63的功能如下：①调控组织发育：研究发现，p63与p53基因的显著不同之处是p53基因的突变诱导肿瘤形成；而p63基因的突变则导致先天性发育障碍疾病：四肢发育畸形、外胚层发育不良等。②抑制肿瘤转移：一方面，p63与Smad蛋白形成复合物，抑制TGF-β诱导的肿瘤细胞转移作用，而另一方面，p63表达的丢失可以导致细胞迁移能力增强。③调控上皮细胞分化：鳞状上皮组织是由基底细胞向表层推移、分化成其他各层细胞的，主要由基底膜、基底细胞、副基底细胞、中层细胞、表层角化细胞组成。其中，基底细胞又称为储备细胞、子宫颈干细胞，兼备向鳞状细胞分化、不断增殖的潜能。而p63则是诱导基底细胞分化的重要调控基因之一。④其他作用：p63还在细胞凋亡、细胞周期、细胞增殖等方面起着一定的调控作用。EMT的重要相关基因snail、slug可以调控p63蛋白的表达，而研究也发现，肿瘤细胞中p63的表达与E-cadherin的表达水平呈正相关，E-cadherin的表达降低是肿瘤EMT的一个重要标识，所以，p63很可能参与抑制肿瘤细胞的EMT，即抑制癌变。本研究通过检测宫颈鳞状细胞癌中N-cadherin、E-cadherin和p63三者之间的表达以及与宫颈癌临床相关因素之间的相关性，探讨EMT过程与宫颈癌发生发展以及预后之间的关系。目的阐明N-cadherin（N-钙粘附素）、E-cadherin（E-钙粘附素）和p63在低分化宫颈鳞状细胞癌，中高分化宫颈鳞状细胞癌，正常宫颈组织中的表达情况，进而分析这三种蛋白与宫颈鳞状细胞癌的发生、发展关系，并探讨宫颈癌患者的年龄、组织分化、临床分期、淋巴结转移和五年生存情况对三种蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达的影响及其临床意义。方法采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP法)对131例宫颈癌组织及30例正常宫颈组织标本做N-cadherin、E-cadherin和p63标记，采用半定量积分法判定阳性结果。E-cadherin、N-cadherin和p63表达与临床病理参数之间的关系采用χ2检验分析；E-cadherin、N-cadherin和p63采用χ2检验相关性进行相关分析；采用Kaplan-Meier法评估各基因表达对生存率影响，对生存率曲线的比较采用Log-rank法进行显著性检验。结果（1）N-cadherin在正常宫颈组织中不表达，在高分化宫颈癌中的强阳性表达率为25%（5/20），中分化宫颈癌中的强阳性表达率为9.7%（6/62），低分化宫颈癌中的强阳性表达率为38.8%（19/49）。并且N-cadherin在低分化宫颈鳞状细胞癌中的表达明显高于正常宫颈组织和中高分化宫颈鳞状细胞癌，差异具有显著性（P＜0.05）。（2）E-cadherin在正常宫颈组织中呈强阳性表达，在高分化宫颈癌中的强阳性表达率为75%（15/20），中分化宫颈癌中的强阳性表达率为38.7%（24/62），低分化宫颈癌中的强阳性表达率为0（0/49），E-cadherin在高分化宫颈鳞状细胞癌中的表达明显高于低分化和中分化宫颈鳞状细胞癌，差异具有显著性（P＜0.05）。（3）p63在正常宫颈组织中呈强阳性表达，在高分化宫颈癌中的强阳性表达率100%（20/20），中分化宫颈癌中的强阳性表达率30.6%(19/62)，低分化宫颈癌中的强阳性表达率2.0%(1/49)，p63在高分化宫颈鳞状细胞癌中的表达明显高于低分化和中分化宫颈鳞状细胞癌，差异具有显著性（P＜0.05）。（4）N-cadherin、E-cadherin和p63的阳性表达率均与宫颈癌的组织分化、临床分期、有无淋巴结转移以及术后复发有关（P＜0.05），而均与年龄无关（P＞0.05）。（5）N-cadherin强阳性表达患者生存期明显低于阴性表达者，E-cadherin、p63阴性表达患者生存期明显低于强阳性表达者。结论（1）N-cadherin高表达和E-cadherin、p63的低表达与宫颈癌的发生发展和转移相关。（2）N-cadherin高表达和E-cadherin、p63的低表达与宫颈癌的预后相关。