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目的:研究不同方法制备的ADM(脱细胞真皮)的组织相容性及其促毛细血管生长和真皮组织再生重建能力的差异。方法:(1)应用胰蛋白酶消化-去污剂法制备ADM;(2)用0.5mol/L乙酸溶液提取制备I型鼠尾胶原;(3)用0.02%戊二醛溶液浸泡ADM5-10min, 制成交联型ADM;另一部分ADM用质量分数0.25%的I型鼠尾胶原浸泡24h,制成胶原包埋型ADM,冰冻保存;(4)用酶消化法培养原代成纤维细胞,取第三代增殖期细胞,将其调整至浓度为2×105/ml的成纤维细胞(Fb)悬液。取细胞悬液,分别接种在铺有交联型ADM和胶原包埋型ADM的24孔培养板上孵育,每组复种9孔,相同数量的Fb接种于空白培养孔中作为对照,接种后1,3,5天行细胞计数,比较两种ADM上生长的成纤维细胞增殖率。(5)取48只Balb/c小鼠,随机分为ADM0(交联组)组和ADM1组(胶原包埋组)两组。将两种ADM分别植入Balb/c小鼠皮下,定期观察小鼠创面的皮肤变化。(6)术后1,2,4,8周,每组任取6只小鼠,取ADM行HE染色、SP法VWF(von willebrand factor)免疫组化观察毛细血管内皮细胞浸润生长情况和VG染色观察ADM的胶原纤维结构改变。 结果:1、细胞毒性实验:在胶原包埋型ADM上生长的Fb增殖速度明显高于交联型,两者比较有显著性差异(P<0.05)。2、动物实验:大体观察显示两组小鼠均有毛发脱落现象,ADM0组小鼠的持续时间更长,并伴有肉芽组织创面形成,ADM1降解时间更长。VWF免疫组化发现在皮下埋藏4周后,ADM0中浸润生长的内皮细胞数明显高于ADM1。VG染色和HE染色结果显示ADM0染色较深;ADM1的胶原染色出现时间更早,胶原排列更整齐有序,新生胶原形态近似正常真皮,更有利于真皮组织的重建。结论:胶原包埋型ADM具有良好的组织相容性和促真皮组织再生重建能力,是较好的组织工程支架材料。