不同蛋白酶的环糊精/嵌段聚合物自组装研究

来源 :山西大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:candyyao007
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蛋白酶是一类重要的洗涤添加剂,它能够水解肽键、酰胺键等专一地作用于蛋白质。通常碱性蛋白酶只有在适宜的pH值水溶液中才能发挥作用,并且,蛋白酶本身属于蛋白质,容易在水溶液中水解失活,因此,研究对蛋白酶的保护具有非常重要的意义。目前,研究较多的是在液体蛋白酶中添加稳定剂,保护酶的活性。但是,这只能减缓蛋白酶的失活,并且效果不是很好。我们课题组利用β-环糊精与嵌段聚合物自组装可以形成空心纳米微球的特点,选取蛋白酶中的碱性蛋白酶,将其包裹起来,保护蛋白酶的酶活。本论文主要从以下几方面研究自组装包裹碱性蛋白酶。首先,对自组装机理进行研究,主要从粒径、Zeta电位、红外光谱和TEM方面进行综合验证自组装包裹的合理性;其次,选择市售的五种碱性蛋白酶,其中三种为液体蛋白酶,二种为固体蛋白酶,分析它们的粒径和Zeta电位,发现五种蛋白酶有在粒径和Zeta电位上存在明显的差异,并对液体酶进行两两混合,研究其粒径和Zeta电位;最后,利用β-环糊精与F68自组装包裹单一碱性蛋白酶和混合碱性蛋白酶,研究它们包裹效果的差异,并且研究了 F68的量对自组装的影响、不同嵌段聚合物对自组装的影响和pH对自组装的影响。研究发现,自组装包裹的差异与蛋白酶的粒径和Zeta电位有关,单一蛋白酶或者混合酶的粒径在200nm~500nm之间,Zeta电位绝对值大于10mV时,包裹效果最好;F68的量为0.91g/100mL时,包裹效果最好;三种不同系列的嵌段聚合物中的包裹有明显的差异,其中,F系列的自组装包裹效果最好;改变自组装溶液的pH,会使自组装包裹效果减弱。综合分析,影响自组装包裹的因素有蛋白酶的粒径,蛋白酶的Zeta电位,嵌段聚合物和自组装溶液的pH值等。这对碱性蛋白酶在洗涤剂中的应用具有重要的意义。
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