基于单颗粒Au纳米立方体的超灵敏肺癌标志物的检测研究

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肿瘤标志物,如蛋白、DNA、RNA的检测已成为一种精准有效的癌症诊断的方法。在所有的肿瘤标志物中,MicroRNA作为一种重要的标志物,对于癌细胞的诊断,尤其是肺癌细胞的早期检测起着至关重要的作用,其中MicroRNA205已经被证实在肺癌病患的血清以及唾液当中过表达。而在过去的20年当中,许多分析方法被用于核苷酸的检测当中,基于金或银等贵金属单个纳米颗粒局部表面等离子共振(LSPR)信号因具有独一无二的光学特性,准确定位性,实时监测性,成为了一种有效,超敏的核苷酸检测方法。因此,本文制备了一种基于单个金纳米立方颗粒LSPR信号的超敏生物传感器,去实现肺癌肿瘤标志物MicroRNA205的实时动态监测。本文首先采用种子生长法合成了棱长约为50 nm的Au纳米立方颗粒,并利用紫外光谱(UV),扫描电子显微镜(SEM),透射电子显微镜(TEM)等方法对制备的纳米颗粒进行形貌以及光谱性质的表征。将其固定在玻璃片上,使之和能够与MicroRNA205互补配对的DNA杂交。最后在暗场显微镜(DFM)下,实时动态观测由于探针与目标检测物MicroRNA205杂交而引起的探针表面微环境折射率的变化而引起的LSPR光谱的变化情况。实验结果表明,其检测限可达到10 pM。为了精确的表征单个纳米颗粒的SPR光学性质,需要联用高分辨的光学显微镜与光谱仪,这也对光信号的采集与分析提出了新的要求。目前实验所采得的光信号是由全阵列采集模式获取的16位黑白图像。为了将图像中的有效光谱数据快速读取出来,我们开发了相应的图像处理软件以提高工作效率,对于精确分析光谱峰位置与界面物质浓度之间的关系提供了一种可靠的分析算法。此外,文章最后还利用不同形貌的金纳米颗粒作为模板,制备了内部形貌可控的中空介孔二氧化硅纳米颗粒。
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