目的自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)发病机制未明,目前尚没有针对病因的防治措施。近年研究发现,肠屏障损伤参与多种肝病的发生和发展,但关于其在AIH发病中的作用及机制研究尚少。本研究首先通过给予小鼠不同浓度葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)饮用水喂养,以优化DSS诱导肠屏障损伤但尚未发生溃疡性结肠炎的浓度,建立肠屏障损伤小鼠模型;然后再通过序贯给予小鼠口服优化浓度的DSS饮用水和尾静脉注射刀豆蛋白A(Concanavalin A,Con A),以研究肠屏障损伤在AIH小鼠发病中的作用,并分析其可能的机制,从而为探索AIH的发病机制及基于肠肝对话的AIH防治策略开辟新的前景。方法1、肠屏障损伤小鼠模型的建立:将C57BL/6小鼠分为对照组、1%DSS组、2%DSS组,分别给予蒸馏水、1%DSS饮用水、2%DSS饮用水喂养7天。观察小鼠粪便性状、有无血便和肛周红肿等一般情况,检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,肝脏苏木素伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色并行Knodell炎症活动度评分,评价有无肝脏炎性损伤,测量结肠长度并取远段结肠标本作HE染色和紧密连接蛋白闭合蛋白(Occludin)和闭锁小带蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)免疫组化染色,评价结肠粘膜损伤程度,根据实验结果优化DSS诱导小鼠肠屏障损伤但尚未发生溃疡性结肠炎的浓度,建立肠屏障损伤小鼠模型并用于后续实验造模。2、肠屏障损伤在自身免疫性肝炎小鼠发病中的作用:将C57BL/6小鼠分为对照组、Con A组和DSS+Con A组,Con A组给予饮用蒸馏水并于第7天始经尾静脉注射Con A(15mg/kg),DSS+Con A组给予1%DSS饮用水并于第7天始经尾静脉注射Con A(15mg/kg),对照组给予饮用蒸馏水并于第7天始经尾静脉注射等量无菌PBS。各组小鼠均喂养7天。通过检测血清ALT和AST水平,肝脏HE染色并行Knodell炎症活动度评分,评价有无肝脏炎性损伤,取远段结肠标本作HE染色和紧密连接蛋白Occludin、ZO-1免疫组化染色,评价结肠粘膜损伤程度,观察肠屏障损伤在自身免疫性肝炎小鼠发病中的作用。结果1、对照组和1%DSS组小鼠大便性状始终正常,2%DSS组小鼠于第6～7天出现肉眼血便和肛周红肿。1%DSS组小鼠终末体重小于对照组,但大于2%DSS组(P<0.05)。各组小鼠血清ALT、AST水平和肝脏Knodell炎症活动度评分差异均无统计学意义(P>0.05)。1%DSS组小鼠结肠长度与对照组差异无统计学意义(P>0.05),2%DSS组小鼠结肠长度明显短于对照组和1%DSS组(P<0.05)。凡给予DSS饮用水的小鼠结肠均出现炎性病变,紧密连接蛋白Occludin及ZO-1表达减低,且这些结肠病变随DSS给药浓度增加而明显(P<0.05)。由于2%DSS组小鼠结肠炎病变较重,故选择1%DSS用于后续实验造模。2、经尾静脉注射Con A后,小鼠血清ALT和AST的水平显著升高,肝组织学出现肝细胞变性坏死和炎细胞浸润,且DSS+Con A组血清ALT和AST的水平以及肝脏Knodell炎症活动度评分明显高于Con A组(P<0.05)。Con A组小鼠结肠未见炎性病变,DSS+Con A组小鼠结肠出现炎性病变,且紧密连接蛋白Occludin及ZO-1表达较对照组和Con A组减低(P<0.05)。结论1、小鼠经1%DSS或2%DSS饮用水连续喂养7天均可引起肠粘膜炎性损伤,且后者损伤程度明显重于前者并出现血便和溃疡,均未见明显肝脏损伤,故后续实验选择应用1%DSS造模。2、肠屏障损伤可加重自身免疫性肝炎小鼠的发病程度,其可能为研究AIH的发病机制和基于肠肝对话的AIH防治策略开辟新的前景。