MicroRNA--192在UUO幼年大鼠肾间质的表达及雷公藤多苷的干预研究

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目的:研究幼年大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)致肾间质纤维化模型中,肾组织MicroRNA-192(miR-192)的表达与意义,以及应用免疫抑制剂雷公藤多苷(TWP)的干预效果。方法:选用4-5周龄幼年SD雄性大鼠54只,随机等分为三组,假手术组18只、UUO模型组(UUO组)18只及UUO模型雷公藤多苷干预组(TWP组)18只。UUO组及TWP组行手术结扎左侧输尿管以制备肾间质纤维化模型,假手术组只分离左侧输尿管但不结扎。TWP组于造模当日起,每日给予TWP(10mg/kg)研沫溶于生理盐水1ml后灌胃,余两组给予等量生理盐水灌胃。每组分别于术后第3天、7天、14天随机选取6只大鼠,处死后取左肾,采用HE染色及Masson染色法评价各组各时间点肾间质病变的程度,采用实时荧光定量PCR方法对各组各时间点miR-192的表达进行定量检测。结果:1.采用幼年大鼠单侧输尿管梗阻法建立肾间质纤维化模型成功,UUO组与TWP组肉眼均可见离体左肾体积随梗阻时间延长逐渐变大,肾皮质逐渐变薄。2.常规HE染色及Masson染色:假手术组肾脏结构无明显病理改变。UUO组:术后第3天可见部分肾小管扩张,局部炎性细胞浸润,少量胶原纤维着色;第7天肾小管扩张数量增多,大量炎性细胞浸润,肾间质出现纤维化改变;第14天肾小管结构严重破坏,炎性细胞减少,纤维化更加明显。TWP组肾间质的病变程度较UUO组轻,但重于假手术组。3. RT-PCR检测肾组织miR-192的表达:假手术组大鼠肾组织miR-192仅少量表达(P>0.05);与假手术组相比,UUO组大鼠肾组织miR-192的表达增高,且在术后第3、7、14天其表达逐渐上升(P<0.01);TWP组大鼠肾组织miR-192的表达在术后第3、7、14天均较UUO组降低(P<0.01),但仍高于假手术组(P<0.01)。结论:MicroRNA-192在UUO幼年大鼠肾间质的表达随着肾间质损伤程度的加重逐渐增加,提示其可能具有促进肾间质纤维化作用;雷公藤多苷可能通过下调MicroRNA-192的表达的在一定程度上延缓肾间质纤维化。
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