月季种质资源创新技术的研究

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本研究从常规技术和基因工程两个方面对月季种质资源创新技术进行探讨,尝试创造月季的新变异,为今后的月季育种提供新种质或进一步培育成新品种。本试验探索了月季杂交技术中杂交败育问题,并采取若干措施来提高杂交结实率;同时探讨了花粉管通道法在月季基因工程上的应用,将cbf1 基因转入月季当中,培育出抗冻性较好种质;最后对月季种质离体培养保存进行了研究,为月季的其它方法遗传转化及种质保存提供材料及技术支持。1. 蔗糖浓度为5-8%的培养基适于大多数月季品种花粉的萌发,但是不同品种的花粉萌发率在离体培养过程中差异显著,有的花粉萌发率很低,可能是造成杂交败育的原因之一。数据结果分析表明温度是影响花粉发芽的主要因子,25℃是适合花粉发芽的最佳温度。重复授粉、激素处理均有助于杂交不亲和的克服。2. 在2004 年,进行了35 个杂交组合,授粉376 朵,得到18 个果实,110 粒种子。对2005 年得到的7 株杂交苗进行了形态观察和DNA 技术相结合的方法进行杂种鉴定,初步确定其中6 个样株是真正的杂种。3. 在2004 年,通过花粉管通道法涂抹233 朵,获得种子48 粒,出苗21 株,经过冷冻处理,15 株苗木不能存活,对其中的6 株抗性苗进行DNA 分子检测,初步确定2 个样株中均含有cbf1 基因,验证了花粉管通道法转目的基因在月季育种上是可行的。4.对我们引进的月季品种‘红帽子’、‘红衣主教’、‘杂技表演’进行了组织培养试验,通过试验证明,在含有激素的MS 培养基上,三个品种茎段均能正常发芽生根。通过正交试验设计证明:MS +6-BA(1.0mg/L)+NAA(0.10~0.30mg/L)能满足月季组织培养的需要,获得较高的芽诱导率;而MS+ NAA(0.5mg/L)+6-BA(1.0mg/L)则可以获得最高的愈伤组织诱导率和愈伤组织鲜重,1/2MS+IBA(0.5mg/L)则是促进根的生长的最适培养基,试验研究能够为月季种质的保存提供技术支持。
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