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目的:探讨化浊解毒方对慢性萎缩性胃炎(Chronic Atrophic Gastritis,CAG)模型大鼠的作用机制。通过观察化浊解毒方对CAG模型大鼠的一般情况、胃黏膜组织病理学的变化、胃黏膜组织中Hippo/YAP信号通路的MOB1、LATS1、P-YAP蛋白与mRNA的表达水平的变化,探讨化浊解毒方治疗CAG的疗效与作用机制,为浊毒理论治疗CAG的临床应用提供实验依据。方法:1选取70只清洁级SD健康雄性大鼠,体重在250-300g范围内,适应性喂养7天。分组:采用随机数字表法,抽取12只,作为正常组(Normal Group,N),剩余58只大鼠,作为模型组(Model Group,M),随后对模型组大鼠建立CAG模型,采用自由饮用N-甲基-N′-硝基-亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)溶液,雷尼替丁溶液灌胃,配合饥饱失常的联合造模方法,同时正常组规律喂养。第20周,检查大鼠胃黏膜病理状态,随机抽取正常组与模型组大鼠各2只,确认造模成功。重新分组:采用随机对照原则把模型组分为5组:自然恢复组(Spontaneous Recovery Group,SR)、对照组(Vitacoenzyme Group,VG)、化浊解毒方治疗高剂量组(High-doze Group,HG)、化浊解毒方治疗中剂量组(Moderate Group,MG)、化浊解毒方治疗低剂量组(Low-doze Group,LG),每组各10只(注:造模阶段死亡6只)。治疗:VG组予10ml/kg/d维酶素混悬溶液灌胃,生药量为0.006g/ml,HG组、MG组、LG组予10ml/kg/d化浊解毒汤药灌胃,生药量分别为2.8g/ml、1.4g/ml、0.7g/ml,正常组、自然恢复组给予10ml/kg/d蒸馏水灌胃,共灌胃治疗12周。末次给药后禁食水48h,麻醉后取材并处死。2观察造模与治疗期间(前后)大鼠体重、毛色、齿爪色泽、精神状态、食欲、大便情况、舌色等一般情况的变化,使用HE染色法观察胃黏膜病理改变。3免疫组织化学染色法(Immunohistochemistery,IHC)、蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测比较治疗后6组大鼠胃黏膜组织MOB1、LATS1、P-YAP蛋白表达水平。4实时荧光定量-聚合酶链式反应(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction PCR,简称Real Time PCR)检测治疗后6组大鼠胃黏膜MOB1、LATS1的mRNA含量。5使用SPSS21.0统计软件对实验结果数据进行分析。结果:1一般情况:造模阶段:N组大鼠毛色、精神状态、进食水量、大便、灵活性较实验前无明显差别,体重显著增加。M组大鼠毛色晦暗无光泽、凌乱、有脱毛现象,进食饮水量较前减少,精神状态欠佳或出现暴躁伤害行为,大便质软或稀、味臭晦,反应迟钝,体重明显下降。治疗阶段:HG、VG组大鼠一般情况较治疗前有明显好转,MG组较治疗前有所好转,LG组、SR组一般情况改善不明显。2胃黏膜组织病理学观察:肉眼观察:造模阶段:N组大鼠的胃黏膜呈粉红色,组织表面光滑,黏膜皱襞排列整齐;M组大鼠的胃黏膜呈灰白色,组织表面粗糙,部分存在颗粒状隆起,黏膜皱襞稀少、低平或排列紊乱,甚至部分消失。治疗阶段:HG组、MG组、VG组大鼠的胃黏膜病变有明显改善;LG组、SR组大鼠的胃黏膜病变部分改善。组织病理学观察:造模阶段:N组黏膜层厚度正常,上皮细胞完整,固有腺体排列整齐、数量适中,无炎性细胞浸润;M组黏膜层变薄,上皮细胞变性、坏死、脱落,固有腺体排列紊乱、数量减少,黏膜肌层变厚,间质存在炎性细胞浸润。治疗阶段:经治疗后,HG组、VG组、MG组大鼠胃黏膜病理改善明显,胃黏膜厚度适中,上皮细胞无明显变性坏死,固有腺体排列较整齐,数量适中,明显高于M组,与N组数量相近,间质存在少量炎性细胞浸润;LG组、SR组黏膜有部分改善,但腺体数量少,明显低于N组、HG组、VG组、MG组,与M组数量相近。3化浊解毒方对CAG大鼠胃黏膜中MOB1表达水平的影响:HG组的光密度平均值、灰度值、mRNA均高于VG组、MG组、LG组,差异有统计学意义(P<0.05),MG组、LG组均低于VG组,差异有统计学意义(P<0.05),MG组高于LG组,差异有统计学意义(P<0.05)。4化浊解毒方对CAG大鼠胃黏膜中LATS1表达水平的影响:HG组的光密度平均值、灰度值、mRNA均高于VG组、MG组、LG组,差异有统计学意义(P<0.05),MG组、LG组均低于VG组,差异有统计学意义(P<0.05),MG组高于LG组,差异有统计学意义(P<0.05)。5化浊解毒方对CAG大鼠胃黏膜中P-YAP表达水平的影响:HG组的光密度平均值、灰度值均高于VG组、MG组、LG组,差异有统计学意义(P<0.05),MG组、LG组均低于VG组,差异有统计学意义(P<0.05),MG组高于LG组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:化浊解毒方能够改善CAG模型大鼠的一般情况,明显改善CAG大鼠胃黏膜病理变化,该方通过上调CAG大鼠胃黏膜中Hippo/YAP信号通路MOB1、LATS1、P-YAP的表达水平而发挥作用。高剂量的化浊解毒方能显著改善胃黏膜病理情况,在上调CAG大鼠胃黏膜中MOB1、LATS1、P-YAP的表达水平方面优于维酶素。