冷冻干燥及高温煅烧制备去抗原异种骨支架材料的理化性能及生物相容性研究

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目的:比较煅烧及冷冻干燥两种不同处理方法下去抗原异种松质骨支架材料的各项理化特性,初步评价冻干羊松质骨支架材料的生物相溶性。方法:将新鲜的绵羊脊椎松质骨切成5×5mm,去除软组织后放入甲醇/氯仿(3:1)中进行化学处理,将经过化学方法处理的羊松质骨放入马弗炉中,待其温度缓慢升到1000℃时在1000℃高温下煅烧2h制备成煅烧骨;将经过化学处理的羊松质骨放入-80℃冰箱中冷冻4周,然后在真空仪器中干燥制备成冻干骨,60Co照射消毒;将经过超纯水冲洗干净的羊松质骨当做对照组。分过观察三组组织学、测定孔隙率、能谱元素分析、衍射分析及力学测试研究煅烧骨及冻干骨材料的理化性能,经过MTT、热源实验、急性毒性实验、皮内刺激试验,初步评价冻干羊松质骨支架材料的生物性能。结果:支架材料均保留与人体骨组织类似的多孔三维结构,通过微观观察,它们的框架保存完整,有较小的孔隙(55-650u m),和较高的孔隙率(65%-80%),煅烧后的支架材料韧性降低而脆性明显增加,冷冻干燥处理后力学性能则下降不大,经过衍射分析它们的主要成分为羟基磷灰石,但煅烧组中还含有少量的β-磷酸三钙,经能谱分析它们钙磷含量比均接近人体的钙磷比。生物相容性的检测,冻干组支架材料没有细胞毒性,无急性毒性及热源反应,皮内刺激试验正常,化学组有细胞毒性及轻微急性毒性反应,有致热源作用及轻度刺激性。结论:冷冻干燥及高温煅烧制备支架材料理化性能基本达到骨组织工程支架材料要求,冷冻干燥制备支架材料具有良好生物相容性,达到了生物支架材料安全标准。
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