基于表面引发—可逆加成—断裂链转移聚合的硼酸亲和吸附剂制备及其在核苷分离富集中的应用

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顺式邻二羟基类化合物在自然界中分布广泛、种类繁多,包括糖蛋白、糖类、核苷、儿茶酚胺、一些黄酮和多酚类物质等。在生物样品中,顺式邻二羟基物质的丰度通常很低,样品背景干扰很大,直接分析非常困难,因此选择性的分离富集是分析这类物质的关键。研究表明硼酸亲和材料对顺式邻二羟基类物质具有高度选择性,已经在邻二羟基类物质的分离富集中得到广泛的应用。本文以氨化聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(PGMA)微球为基质,采用表面引发-可逆加成-断裂链转移聚合(SI-RAFT)技术,制备了一种高吸附容量的新型硼酸亲和吸附剂,并将该吸附剂用于血清样品中核苷的分离富集。主要内容包括:(1)首先将合成好的链转移试剂十二烷基-2,2-二甲基乙酸三硫酯(DDATC)键合在氨化PGMA微球表面,应用SI-RAFT将间丙烯酰胺基苯硼酸聚合到微球表面,制备出了一种新型硼酸亲和吸附剂,该吸附剂具有吸附容量高、吸附动力学快、选择性高等特点,对腺苷的最大吸附容量为99.2μmol/g,并且可在2 min内达到吸附平衡。(2)将该硼酸亲和吸附剂用于小牛血清中核苷的富集,采用反相高效液相色谱-紫外检测分析。研究了被分析样品溶液的pH、盐浓度和吸附剂用量等因素对核苷富集效率的影响。结果表明,当被分析核苷样品pH为8.5-9,吸附剂用量为100 mg时,核苷的回收率最高。在优化的条件下,采用标准加入法对小牛血清中的核苷进行分析,检测出小牛血清中尿苷和鸟苷的含量分别为170±1.6 ng/mL和39.6±4.4 ng/mL。
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