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急性肺损伤(ALI)是由多种病因引发的一种急性、炎症性肺损伤疾病。虽然炎症反应失控被视为其发病的一种本质性病因,但是抗氧化失衡也是该病发生的一个重要因素。因此,抗炎抗氧化作用将成为一种防治ALI发生的新思路。远志皂苷元是一种从中药“远志”中提取的远志皂苷类小分子化合物,该化合物具有显著的祛痰镇咳、抗氧化及抗炎症等生物学活性。然而,针对远志皂苷元缓解急性肺损伤及其作用机制的研究仍需要进一步探究。本实验通过构建体内外炎症和氧化损伤的模型,初步探究远志皂苷元的抗炎抗氧化活性及其作用机制。在体外,我们利用LPS和H2O2诱导RAW 264.7细胞炎症损伤和氧化损伤模型。首先使用MTT法筛选远志皂苷元无细胞毒性的作用浓度,并利用酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫荧光、免疫印迹法(Western Blot)、流式细胞术(FCM)以及si RNA转染等技术,从细胞、分子、凋亡及信号传导方面对远志皂苷元体外作用机制进行探究。然后,在体内,我们又利用LPS诱导急性肺损伤的模型,进一步探究远志皂苷元在体内对LPS造成的小鼠肺组织炎症损伤和氧化损伤的保护作用及其相关分子机制。上述结果表明:1.实验结果(一)表明:远志皂苷元不仅能够显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎性因子TNF-α、IL-6以及IL-1β产生、减少炎性介质NO和PGE2产生及其合酶i NOS和COX-2的m RNA和蛋白的表达,而且能够明显抑制H2O2引发的ROS的过多产生、降低细胞凋亡/坏死百分比并减少MDA产生和SOD、GSH抗氧化酶的消耗。因此,这提示,远志皂苷元在体外具有明显的抗炎抗氧化双重活性。2.实验结果(二)表明:远志皂苷元不仅能够抑制LPS激活的NF-κB和MAPK信号通路,而且能够显著上调Nrf2/HO-1信号通路。然而,在使用si RNA沉默HO-1后,远志皂苷元抑制炎症反应和氧化应激的活性部分被减弱。因此,这些结果提示,远志皂苷元在体外可以通过抑制NF-κB和MAPK信号通路的激活发挥抗炎活性,而通过上调Nrf2/HO-1信号通路发挥抗炎抗氧化双重活性。3.实验结果(三)表明:基于远志皂苷元在体外良好的抗炎抗氧化活性及其较为明确的作用机制,本实验又进行对远志皂苷元在LPS诱导的小鼠ALI模型中保护作用及其机制的研究。结果表明,远志皂苷元能够显著改善LPS诱导的小鼠肺组织病理学改变,降低小鼠肺W/D比重、BALF中蛋白浓度以及巨噬细胞和中性粒细胞的大量渗出。另外,远志皂苷元明显抑制LPS诱导的BALF中TNF-α、IL-6和L-1β分泌,ROS过多产生,降低COX-2蛋白表达,减少MDA和MPO的产生以及抗氧酶SOD和GSH的消耗。最重要的是,远志皂苷元抑制了LPS诱导的小鼠ALI中p38/ERK的磷酸化、阻止IκBα磷酸化及降解,并上调Nrf2/HO-1蛋白表达。