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研究背景 随着体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)设备改进更新,手术技术不断提高,婴幼儿先天性心脏病手术成功率明显升高、死亡率持续下降,但是一些婴幼儿仍由于严重肺部并发症而死亡。体外循环可导致炎性细胞在肺内潴留,引发肺部炎症性疾病及气道高反应,故有必要对肺局部免疫情况进行研究。支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)的成分变化与血液的变化常不平行,因此通过对BALF的分析,有助于了解肺局部免疫和病理过程。因此探讨不同基础情况下,心内直视术病例BALF中的细胞因子及免疫状态,对术后发生的问题及预后有重要的临床意义。但与体外循环手术相关的气道高反应,尤其是通过支气管肺泡灌洗液这种简单有效途径测定sICAM-1、IL-8尚无报道。 研究目的 本实验采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法动态检测患儿围术期支气管肺泡灌洗液中细胞因子sICAM-1、IL-8的变化规律,了解体外循环和肺动脉高压对肺局部sICAM-1和IL-8的影响,为临床诊疗寻找监测气道高反应的有价值的分子生物学指标。浙江大学硕士学位论文中文摘要研究对象 一、体外循环组:选择2003年3月一2003年6月在浙江大学附属儿童医院行体外循环手术的先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)患儿34例,根据术前有无肺高压将体外循环组分为: I、无肺高压组:25例,男性14例,女性11例,年龄4一76月,平均(32.40士23.71)月,体重7一24Kg,平均(12.40士4.94)Kg。 n、肺高压组:9例,男性6例,女性3例,年龄12一60月,平均(30.67士16.1)月,体重6一17Kg,平均(11.78士3.64)Kgo 所有病人术前均经心脏B超计算肺动脉压力,5例病人经心导管测压证实。心超、心导管检查肺动脉压〕30mi证19。 二、非体外循环组:选择2003年3月一2003年6月在浙江大学附属儿童医院行非体外循环普胸手术患)L20例,男性n例,女性9例,年龄6一84月,平均(29.45士19.03)月,体重5一23Kg,平均(14.87士4.89)Kg。 两组患儿术前均未使用免疫抑制剂,无感染性及免疫性疾病。两组患儿性别、年龄、体重无显著性差异。研究方法 体外循环组患儿分别于麻醉插管后手术前、手术后2一3h、手术后24h共3个时点采集肺泡灌洗液。采用固相酶增敏免疫分析法(EnzymeAmp 1 1 ried Sensitivity Inununoassay,EASIA)检测IL一8的含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测IC胡一1含量。采用SPSS for windows 10.0版本进行数据统计分析。浙江大学硕士学位论文中文摘要 果肺高压组中的嗜酸性粒细胞(10.92士2.59)和中性粒细胞(n.56土2.69)的百分比均显著高于无肺高压组(5 .43士1.36,6.37士1.41)和非体外组(2.16士0.27,3.56士0.48)(P<0.01);非体外循环组、无肺高压组和肺高压组sICAM一1(ng/m1)的变化比①术前:肺高压组(148.01士39.57)与无肺高压组(86.44士15.80) 比较,差异有显著性(P<0.01);②术后2一3h:体外循环组与非体外组比较差异有显著性(P<0 .01), 体外循环中肺高压组(220.54士38.25)与无肺高压组(175.97士 33.10)相比有显著意义(P<0.01);③术后24h:肺高压组(251.31土42.26)与无肺高压组(148.20士 27.61)比较,差异有显著性(P<0.01);④肺高压组术后2一3h、24h与术前比较,差异有显著性(P<0 .01);3.非体外循环组、无肺高压组和肺高压组IL-8印叭)的变化比较: ①术前:肺高压组(106.18士20.82)与无肺高压组(44.01士巧.92) 比较,差异有显著性(P<0 .01); ②术后2一3h:体外循环组与非体外组比较差异有显著性(P<0.01), 体外循环中肺高压组(202.69士37.39)与无肺高压组(108.81士 34.03)相比有显著意义(P<0.01); ③术后24h:肺高压组(174.87士41.47)与无肺高压组(80.23士 30.14)比较,差异有显著性(P<0 .01): ④肺高压组术后2一3h、24h与术前比较,差异有显著性(P<0.01);浙江大学硕士学位论文中文摘要4.使用SPear,n相关分析法就肺泡灌洗液中sICAM-1与IL一8的表达进行相关分析,Spearman相关系数Y=0.678,P=0.012<0.05,说明s1CAMwel在BALF中的变化情况与IL一存在正相关;5.合并肺动脉高压患儿术后出现气道高反应的比例(6/9)高于其他无肺动脉高压患儿(5/25)(X,=5.81,P=0.034<0.05)。结论1.体外循环使肺泡灌洗液中SICAM一1和工L一8水平升高,可能与体外循环 术后的气道反应性增高有关:2.合并肺动脉高压的左向右分流患者SICAM一l和IL一8水平高于无肺动脉 高压组,术后容易出现呼吸道并发症,易致高反应发生;3.sICAM一1和IL一8在体外循环过程中的变化情况存在正相关,在增加气 道反应性方面有协同关系。