应用聚集诱导荧光探针检测微藻中汞富集的研究

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heyouzhang033
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本论文应用一种具有聚集诱导发光(AIE)特性的新型荧光染料探针m-TPE-RNS监测了裸藻(Euglena gracilis)对Hg2+的吸收与释放过程,建立了稳定、可靠的检测方法,为研究汞在水生食物链中的生物富集效应提供了参考。结果表明:m-TPE-RNS在水和乙腈(ACN)比例为3:2的反应体系中,用350 nm紫外线(UV)激发于480 nm处有最大峰值;与Hg2+反应后,其在590 nm处有最大峰值;m-TPE-RNS与Hg2+反应的荧光强度(PL)与二者浓度比例相关,呈三维关系;而当Hg2+与m-TPE-RNS的比率小于1时,反应体系中Hg2+浓度和PL强度之间呈线性关系。选择淡水培养的裸藻为试验对象,确定了Hg2+对藻细胞的作用浓度。当Hg2+浓度从0增加到30μM时,裸藻细胞收缩成包囊状的比例逐渐增加。当Hg2+浓度为30μM时,藻细胞的伸缩泡消失,中心部分变得凝聚并起皱。用10μM、20μM和30μM浓度的Hg2+处理裸藻细胞1 h后,将其转移至清水中,24 h后以藻细胞形态和游动能力为指标计算其恢复率,各处理组分别为93%、67%、10%。用浓度为10μM和20μM的HgCl2处理裸藻细胞,经过m-TPE-RNS反应后溶液中PL强度较对照组有显著下降,表明藻细胞吸收Hg2+显著,之后PL强度变化趋势渐缓,1 h后基本稳定。根据Hg2+浓度与PL强度的关系,30 min时,10μM和20μM的HgCl2处理组中裸藻细胞的生物富集量分别为0.64μg/mg和1.13μg/mg。30 min到60 min,裸藻细胞中Hg2+的富集量增长不显著。浓度为10μM和20μM时,相对溶液中,裸藻细胞中Hg2+的生物富集效率(Et)在1 h内分别增加至4和5倍。裸藻细胞在20μM HgCl2中处理45 min,然后转移至纯水中,在3 h和24 h分别检测其中Hg2+含量,为0.02μg/mg和0.013μg/mg。Hg2+在裸藻细胞内和细胞外环境之间存在动态平衡关系,细胞内、外的Hg2+浓度梯度决定释放的效率。
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