氧化大豆蛋白对小鼠氧化还原状态及肝脏基因表达的影响

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在加工和贮藏期间,食物中的蛋白质在不饱和脂肪酸、金属离子、风味物质、氧化酶类等促氧化成分的影响下,易发生氧化。氧化会导致蛋白质结构、理化性质的改变,但是食物蛋白氧化是否会引起机体生理活性的改变,目前尚无报道。本课题重点探讨加热及脂质氧化产物—MDA氧化大豆蛋白对小鼠氧化还原状态和肝脏基因表达的影响。大豆蛋白经100℃加热30、60、90 min及不同剂量(0.1、10、50、100 mmol/L)MDA氧化处理,考察了氧化大豆蛋白的羰基含量、抗氧化能力和体外消化率;并观察了短期灌胃加热90 min蛋白对小鼠血液ROS的影响。小鼠分别饲喂大豆蛋白日粮、MDA氧化大豆蛋白日粮、加热大豆蛋白日粮、加热大豆蛋白添加0.08% LA日粮,第3w进行消化实验,4w后测定各组动物血液和组织的ROS水平和机体其它氧化还原相关指标(T-OAC、MDA、SOD、GSH-Px、CAT)。此外运用肝脏基因表达芯片观察不同氧化处理蛋白对肝脏基因表达的影响,并通过RT-PCR考察了肝脏、空肠组织相关基因的表达变化。论文主要研究结果如下:(1)加热时间的延长和MDA浓度的增加,都会导致大豆蛋白羰基含量提高,DPPH·清除能力减弱。(2)100℃加热90 min和50 mmol/LMDA氧化均会引起大豆蛋白体外消化率的降低,特别是MDA氧化组较对照组显著下降。(3)灌胃加热90 min蛋白60 min导致小鼠血液ROS水平显著升高。(4)MDA氧化或加热90 min显著降低蛋白消化率,而脂肪消化率略有升高;加热蛋白添加LA后,粗蛋白消化率显著增加,而脂肪消化率略有升高。(5)摄食加热或MDA氧化大豆蛋白日粮4w,导致小鼠全血和组织ROS水平显著上升,MDA含量显著增加,T-OAC和抗氧化酶(SOD、GSH-Px、CAT)活性显著下降,导致氧化应激,而添加LA有助于缓解机体氧化损伤。(6)肝脏基因表达芯片的结果表明摄入氧化蛋白会引起脂肪代谢、免疫、内分泌系统、信息处理过程、疾病等相关通路的改变,而LA能使相关基因通路的改变恢复或部分恢复至正常水平。(7)氧化组肝脏中与脂肪合成代谢相关的基因SREBP-1c、ACC基因表达下调,ACOX1和PPARα表达上调,提示脂肪酸β-氧化增加,而添加0.08% LA可使上述基因表达水平恢复或部分恢复到正常水平。空肠中除加热蛋白ACOX1外,PPARα和SREBP-1c基因表达趋势与肝脏相近。
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