心痛泰对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性影响的实验研究

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目的:探讨心痛泰颗粒影响ApoE-/-小鼠AS模型斑块稳定性的作用机理。方法:选取42只6-8周龄雄性ApoE-/-小鼠饲养于本校SPF级实验室,给予高脂饮食(配方:2%胆固醇+10%猪油+10%蛋黄粉+0.2%猪胆盐+77.8%基础饲料)喂养,另选取12只C57BL/6J野生型小鼠作为空白组,予普通饲料喂养。12周后,从两种小鼠中各随机取出2只,HE染色后观测,显示ApoE-/-小鼠主动脉有明显不稳定动脉粥样斑块形成,而C57BL/6J小鼠主动脉内膜光滑,表明AS模型制备成功(图1)。将造模成功的40只ApoE-/-小鼠按《统计学》中的随机数字表法分为模型组,心痛泰颗粒低、高剂量组及阿托伐他汀钙组,外加空白组(C57BL/6J野生型小鼠)。灌胃给药,连续8周,在无菌条件下处理动物,HE染色后高倍显微镜下观察主动脉组织病理变化(斑块面积/动脉壁横切面积(%)),Masson染色后高倍显微镜下观察斑块内胶原含量的变化(胶原含量/斑块面积(%)),采用酶法和比色法检测血脂指标、ELISA测定血清CRP、MMP-9、TIMP-1,IHC法检测斑块内MMP-9,TIMP-1的表达水平。结果:1.与模型组比较,药物组均能降低TC、TG、LDL-C,升高HDL-C,且心痛泰颗粒高剂量组优于低剂量组(P<0.01),但心痛泰颗粒高剂量组与他汀组组间无差异(P>0.05)。2.与模型组比较,药物组均能明显降低血清中CRP、MMP-9的浓度,升高TIMP-1的浓度,且心痛泰颗粒高剂量组优于低剂量组(P<0.01),但心痛泰颗粒高剂量组与他汀组组间无差异(P>0.05)。3.与模型组相比较,药物组能抑制斑块内MMP-9的阳性表达(P<0.01),促进斑块内TIMP-1的阳性表达(P<0.01),且心痛泰颗粒高剂量组优于低剂量组(P<0.01),但心痛泰颗粒高剂量组与他汀组组间无差异(P>0.05)。结论:1.显微镜观测显示,心痛泰颗粒能改善AS小鼠主动脉组织病理学变化,明显降低斑块面积比,且心痛泰颗粒高剂量组比低剂量组降低程度明显。2.心痛泰颗粒能明显下调AS小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白(LDL-C),上调高密度脂蛋白(HDL-C),说明心痛泰颗粒可以通过调节血脂稳定斑块来干预AS的发展。3.心痛泰颗粒能增加胶原含量,从而增加粥样斑块的稳定性。4.心痛泰颗粒能减少血清中CRP、MMP-9的含量,增加TIMP-1的含量,高剂量组比低剂量组减少/增加程度明显,可能是通过减轻全身炎症,延缓AS的发生、发展从而稳定斑块。5.心痛泰颗粒能抑制斑块内MMP-9的表达,促进斑块内TIMP-1的表达,调节斑块内MMP-9/TIMP-1的平衡,因此可能通过此途径来干预ECM的降解,从而发挥稳定粥样斑块的作用。
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