论文部分内容阅读
昆虫共生放线菌在近年来逐渐的被研究者们所重视。在放线菌的分离过程中,传统分离源(如：土壤资源、植物资源及海洋资源)中的新放线菌逐渐的枯竭。因此,在寻找发现新的放线菌天然活性产物的过程中,非重复放线菌菌株的分离已成为人们急需解决的问题。同传统分离源类似,昆虫庞大的种类和数量保证了分离源的充足。一些昆虫同样具有药用价值,并且从昆虫体内同样能够分离得到很多具有生物活性的化合物。同时也能够为我们得到的共生放线菌代谢产物活性的测试提供一些潜在的、可参考的靶标,对于发现新的天然活性化合物具有重要的意义。本研究首次选择药用昆虫拟黑多刺蚁(Polyrhachis vicina Roger)为放线菌的新分离源。我们对其体内共生放线菌进行筛选分离、菌株代谢产物活性研究以及新菌的分类学鉴定。至今,利用新方法,从新分离源——拟黑多刺蚁的体内分离得到37株体内共生放线菌。在活性测试中,发现8株放线菌的发酵液浸提物对两种细菌抑制活性达到15mm以上；8株放线菌单菌落抑制十种植物病原真菌活性较强；6株放线菌的发酵液浸提物对部分植物病原真菌的抑制活性达到10mm以上,并利用多相性分析的方法对2株新放线菌进行鉴定。通过分离所得到菌株的培养形态观察及活性测试结果,对其中3株(NEAU-ycml、 NEAU-ycm2及NEAU-ycm3)进行16S rDNA的基因测序和系统发育分析。其中2株菌(NEAU-ycm2、NEAU-ycm3)属于小单孢菌属,1株菌(NEAU-ycm1)属于链霉菌菌属。由于NEAU-ycm1和NEAU-ycm2的16S rDNA的基因序列较低的相似度,并且NEAU-ycm2的gyrB基因序列相似性同样很低,所以将这2株菌进行了多向性的分析,并进行了分类学的鉴定。因此确定NEAU-ycml和NEAU-ycm2分别为链霉菌菌属和小单孢菌属的一个新种,分别命名为Streptomyces polyrhachis和Micromonospora polyrhachis,并委托中国科学院微生物研究所(CGMCC4.7094)和德国不伦瑞克市德国菌种保藏中心(DSM42102)保藏。由此可见,采用新分离源及新方法分离放线菌明显提高了得到新放线菌的比例,也为发现新的天然活性化合物奠定了良好的基础。