【摘 要】
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研究背景喉鳞状细胞癌（LSCC）是一种常见的头颈部恶性肿瘤,发病率呈逐年上升趋势。环状RNA（circRNA）在恶性肿瘤进展中的关键调节作用已经得到证实。我们研究的目的是探索circ＿CCND1在LSCC进展中的功能作用和潜在作用机制研究方法进行实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测circ＿CCND1、microRNA-136-5p（miR-136-5p）和泛素特异性蛋白酶7（USP7）mR
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研究背景喉鳞状细胞癌（LSCC）是一种常见的头颈部恶性肿瘤,发病率呈逐年上升趋势。环状RNA（circRNA）在恶性肿瘤进展中的关键调节作用已经得到证实。我们研究的目的是探索circ＿CCND1在LSCC进展中的功能作用和潜在作用机制研究方法进行实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测circ＿CCND1、microRNA-136-5p（miR-136-5p）和泛素特异性蛋白酶7（USP7）mRNA的表达。进行RNase R检测和Actinomycin D检测以确定circ＿CCND1的特性。采用细胞集落形成试验、Edu结合试验和3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基溴化四唑（MTT）试验分别评估细胞集落形成能力、增殖和细胞活力。利用Western blot检测和免疫组织化学（IHC）检测来检查蛋白质水平。细胞迁移和侵袭通过transwell实验进行测试。流式细胞仪分析用于测量细胞凋亡。利用双荧光素酶报告法确认miR-136-5p和circ＿CCND1或USP7之间的相互作用。进行了肿瘤异种移植试验,探索circ＿CCND1对LSCC体内进展的影响。研究结果qRT-PCR方法测定结果显示circ＿CCND1在LSCC组织和细胞中的水平是增加的。circ＿CCND1的缺失在体外抑制了LSCC细胞的增殖、转移和诱导凋亡,并在体内抑制了肿瘤的生长。circ＿CCND1通过海绵作用吸附miR-136-5p后,可以正向调控USP7的表达。此外,miR-136-5p的抑制可抵消circ＿CCND1敲低对LSCC细胞进展的抑制作用。miR-136-5p过表达通过靶向USP7缓解LSCC细胞的恶性表型。研究结论我们的研究结果表明,circ＿CCND1可能通过调节miR-136-5p/USP7轴促成了LSCC的进展。
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