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目的:研究枸杞多糖粗提物抗衰老作用及其与信号传导系统Ca2+-CaM的相关性。方法:利用D-半乳糖诱导小鼠,建立衰老模型,研究枸杞多糖的抗衰老作用。于给药15周、30周时以小鼠学习记忆行为、抗疲劳能力、组织超微结构及血液学、酶学、CaM等生理生化指标变化对枸杞多糖抗衰老作用进行药效学评价,探讨其抗衰老机制并分析其与Ca2+-CaM信号传导系统的相关性。采用Phenyl-Sepharose层析法从牛脑中分离纯化CaM,PDE法检测其活性;通过SDS-PAGE、PAGE检测其分子量并观察CaM有无Ca2+结合时的电泳行为;应用紫外扫描光谱对CaM进行鉴定。以交联剂碳二亚胺制备CaM偶联抗原并免疫动物,建立间接Elisa法检测免疫动物抗血清效价,以定量测定衰老模型对照组及枸杞多糖组动物的CaM含量,研究其与抗衰老作用的相关性。结果:在枸杞多糖粗提物抗衰老实验中,连续给药15周、30周时,小鼠机体退行性变化有明显的改善;给药组动物在Morris水迷宫、跳台、避暗实验中,到达目标时间缩短,逃避潜伏期延长,错误次数减少、学习记忆能力明显增强;跑步耐力实验中抗疲劳能力增强;胸腺、脾脏指数退行性变化减轻;血流速度加快;血糖浓度有所降低;相关组织和血清中MAO-B、AchE、iNOS、MDA水平降低; SOD、GSH-Px、CAT、ATPase、NO、TNOS活力显著提高;肝肾组织细胞退行性形态学变化较衰老模型对照组减轻。经Phenyl-Sepharose层析法纯化的CaM对PDE有明显的激活作用,电泳结果显示为均一条带,分子量约为17.3kDa,在SDS-PAGE中,结合Ca2+的CaM比未结合Ca2+时迁移率快;而在PAGE中,结合Ca2+的CaM迁移率低于未结合Ca2+;紫外光谱扫描显示在251、260、267、272和283 nm处有5个特征性吸收峰。以CaM偶联抗原免疫动物6周后,琼脂扩散实验有明显的抗原-抗体沉淀线,经ELISA法检测,免疫动物血清效价为1:800,枸杞多糖组小鼠脑组织CaM水平升高。结论:小鼠抗衰老实验结果表明,枸杞多糖能够增强机体的学习记忆能力、抗疲劳能力和免疫力,并能有效清除机体自由基、提高抗氧化酶活力,保护肝、肾等脏器,从生理生化学等方面对机体起到保护作用,具有明显的抗衰老作用。用Phenyl-Sepharose纯化CaM和用碳二亚胺法制备CaM偶联抗原方法简便易行,间接ELISA法可用于定量检测CaM。衰老小鼠脑组织CaM水平下降,可能与细胞内转运Ca2+的ATP酶活力下降有关,因此间接地导致脑组织神经递质水平下降,从而影响学习记忆能力。